5-氨基水楊酸經(jīng)Nur77調(diào)控肺血管內(nèi)皮細(xì)胞重構(gòu).pdf

1、第一部分5-氨基水楊酸改善MCT誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓大鼠的血流動(dòng)力學(xué)
　　目的：探討5-氨基水楊酸對(duì)野百合堿（MCT）誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈高壓的干預(yù)作用。
　　方法： Sprague Dawley(SD)雄性大鼠共60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為：正常對(duì)照組（Control組）、肺動(dòng)脈高壓組（PAH組）和5-氨基水楊酸不同劑量治療組(5ASA-50組，5ASA-100組，5ASA-150組，5ASA-200組)。PAH組、5

2、-氨基水楊酸各劑量治療組在第1天腹腔注射MCT50 mg/kg，對(duì)照組注射等體積生理鹽水。從第2天開始，5-氨基水楊酸各劑量治療組分別給予5-氨基水楊酸50、100、150 mg/kg/d和200 mg/kg/d灌胃，共30天。第32天，對(duì)各組大鼠進(jìn)行以下檢測(cè)：(1)統(tǒng)計(jì)大鼠的體質(zhì)量(body mass)，計(jì)算大鼠體質(zhì)量增量(weight increment)及其生存率；(2)右心導(dǎo)管法測(cè)定肺動(dòng)脈壓力(SPAP,DPAP,MPAP)；(

3、3)分離右心室，測(cè)定右心室肥厚指數(shù)(RVHI)。
　　結(jié)果：1. Control組大鼠的體質(zhì)量和體質(zhì)量增量均較高于PAH組大鼠(P<0.05)；5-氨基水楊酸治療后，除5ASA-150組和5ASA-200組，其余兩組大鼠的體質(zhì)量和體質(zhì)量增量也較 PAH組有明顯升高(P<0.05)；5-ASA治療組合計(jì)生存率較PAH組顯著升高(P<0.05)。
　　2. PAH組大鼠的SPAP，DPAP，MPAP和RVHI均高于Control

4、組(P<0.05)；除5ASA-200組的MPAP和RVHI外，其余5-ASA組的SPAP，DPAP，MPAP和RVHI較PAH組有明顯降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：5-ASA能夠降低野百合堿誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓大鼠的肺動(dòng)脈壓力，減輕右心室肥厚，改善生存率。
　　第二部分孤核受體Nur77參與肺血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和增殖的調(diào)控作用
　　目的：探討Nur77在肺血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與增殖過程中的調(diào)控作用，以及影響Nur77表達(dá)的

5、信號(hào)通路。
　　方法：通過建立MCT誘導(dǎo)的PAH大鼠模型，采用5-ASA進(jìn)行藥物干預(yù)。通過Western Blot、RT-PCR和免疫熒光方法檢測(cè)孤核受體Nur77在肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況。運(yùn)用HE染色觀察肺血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖情況。并進(jìn)一步通過Western Blot和（或）RT-PCR檢測(cè)炎癥介質(zhì)NF-κB p65、IκBα、COX-2、iNOS，凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2、caspase-3，增殖細(xì)胞核抗原 PCNA、MMP-

6、2/-9、TIMP-1/-2以及觀察pAkt，pERK，p-p38 MAPK等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.與PAH組相比，Control組和5-ASA各治療組大鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的Nur77的表達(dá)有顯著升高(P<0.05)。2. Control組和5-ASA各治療組大鼠的炎癥介質(zhì)NF-κB p65、COX-2、iNOS，抑凋亡蛋白Bcl-2，MMP-2/-9，和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子pAkt，pERK和p-p38 MAPK的表達(dá)有明顯