KLF4對(duì)小白菊內(nèi)酯治療人乳腺癌細(xì)胞株增殖敏感性的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討轉(zhuǎn)錄因子Küppel factor4(KLF4)對(duì)小白菊內(nèi)酯(parthenolide，PN)治療乳腺癌細(xì)胞增殖敏感性的影響及可能的作用機(jī)制。
　　方法:通過Real-time PCR法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞株中KLF4表達(dá)水平，LipofectaminTM2000轉(zhuǎn)染pEGFP-KLF4，在BT549細(xì)胞中過表達(dá)KLF4，Real-time PCR和Western blot法檢測(cè)BT549過表達(dá)KLF4后KLF4 mRNA和蛋

2、白表達(dá)水平。LipofectaminTM2000轉(zhuǎn)染siRNA-KLF4，在MCF-7細(xì)胞中敲降KLF4表達(dá)，Real-time PCR和Western blot法檢測(cè)MCF-7細(xì)胞敲降KLF4后KLF4 mRNA和蛋白表達(dá)水平。CCK8法檢測(cè)細(xì)胞增殖率，觀察KLF4過表達(dá)和敲降對(duì)小白菊內(nèi)酯治療乳腺癌細(xì)胞敏感性的影響。細(xì)胞免疫熒光化學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MCF-7細(xì)胞中P21表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期變化。
　　結(jié)果:
　　(1)與p

3、EGFP-control組相比，pEGFP-KLF4轉(zhuǎn)染組的BT549細(xì)胞對(duì)小白菊內(nèi)酯的敏感性明顯提高(P＜0.05)。
　　(2)與siRNA-negative control組相比，siRNA-KLF4轉(zhuǎn)染組的MCF-7細(xì)胞對(duì)小白菊內(nèi)酯的敏感性明顯降低(P＜0.05)。
　　(3)小白菊內(nèi)酯作用MCF-7細(xì)胞48h，細(xì)胞免疫熒光化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與siRNA-negative control組相比，siRNA-KLF4轉(zhuǎn)染組

4、MCF-7細(xì)胞中P21蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)。
　　(4)小白菊內(nèi)酯作用48h，與pEGFP-control組相比，pEGFP-KLF4轉(zhuǎn)染組BT549細(xì)胞G0-G1期細(xì)胞比例明顯升高(P＜0.05);與轉(zhuǎn)染siRNA-negative control組相比，siRNA-KLF4轉(zhuǎn)染組MCF-7細(xì)胞G0-G1期細(xì)胞比例明顯降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論: KLF4在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)水平與小白菊內(nèi)酯治療敏感性成正