白藜蘆醇對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的人髓核細(xì)胞分泌炎癥介質(zhì)的影響.pdf

1、目的
　　觀察白藜蘆醇（Resveratrol，Res）對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的人髓核細(xì)胞分泌 IL-6和IL-8，以及表達(dá)MMP-3和TIMP-1的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法
　　原代分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞，分為3組：（1）空白對(duì)照組（僅給予等體積二甲基亞砜）；（2）IL-1β處理組（加入5 ng/mL IL-1β作用2h）；（3）白藜蘆醇組：加入終濃度為5，30，50μmol/L白藜蘆醇，與細(xì)胞作用0，12，24

2、，36或48h。處理結(jié)束后，ELISA檢測(cè)IL-6和IL-8的產(chǎn)生，real-time PCR檢測(cè)MMP-3和TIMP-1 mRNA的表達(dá)。Western blot分析NF-κB p65亞基的轉(zhuǎn)位。
　　結(jié)果
　　1.陰性對(duì)照組髓核細(xì)胞IL-6和IL-8分泌較低。IL-1β作用2h后，IL-6和IL-8產(chǎn)生顯著增多。而細(xì)胞隨后用不同濃度Res處理后，可呈濃度依賴性方式抑制IL-6和IL-8的分泌。此外，5ng/mL IL-1

3、β作用髓核細(xì)胞12h即可誘導(dǎo)IL-6和IL-8表達(dá)，24h達(dá)到高峰。與IL-1β組相比，50μmol/L Res可顯著降低IL-6和IL-8水平。
　　2.定量PCR顯示對(duì)照組中MMP-3和TIMP-1呈一定程度表達(dá)。IL-1β處理后， MMP-3顯著增高，TIMP-1降低了50％。而經(jīng)不同濃度白藜蘆醇處理后，MMP-3 mRNA水平逐漸降低，TIMP-1接近對(duì)照組水平。
　　3. Western blot結(jié)果顯示，IL-1