大蒜揮發(fā)油提取鑒定及功效研究.pdf

1、研究目的：建立水蒸氣蒸餾法提取大蒜揮發(fā)油的最佳工藝條件；分析大蒜揮發(fā)油的化學成分并建立大蒜揮發(fā)油中大蒜素的測定方法，同時結合大蒜揮發(fā)油功效實驗，為利用大蒜揮發(fā)油開發(fā)成為保健食品、食品添加劑及藥品提供依據(jù)。
　　 研究方法：（1）采用水蒸氣蒸餾法，正交設計考察蒸餾時間、加水量、發(fā)酵溫度、浸泡時間對大蒜揮發(fā)油提取率的影響，確定最佳提取條件。（2）利用氣相色譜-質譜聯(lián)用儀分析大蒜揮發(fā)油各組成成分，并使用氣相色譜內標法測定大蒜揮發(fā)油中大

2、蒜素的含量。（3）通過測量抑菌環(huán)、最低抑制濃度、最小殺菌濃度，研究大蒜揮發(fā)油的抑菌、殺菌效果。（4）72只雄性SD大鼠，通過喂飼高脂飼料制備肥胖高脂大鼠模型，隨機分為6組：陰性對照組（給予蒸餾水灌胃）、高脂模型A組（給予1％吐溫-80灌胃）、高脂模型B組（給予蒸餾水灌胃）、大蒜揮發(fā)油低劑量組（給予11.6mg/bw·kg·d大蒜揮發(fā)油乳劑灌胃）、大蒜揮發(fā)油中劑量組（給予46.3mg/bw·kg·d大蒜揮發(fā)油乳劑灌胃）和大蒜揮發(fā)油高劑量組

3、（給予92.6mg/bw·kg·d大蒜揮發(fā)油乳劑灌胃），8周后觀察給藥后大鼠各項指標，評價大蒜揮發(fā)油的降脂減肥作用。（5）利用四氧嘧啶造模后的糖尿病小鼠，給予高、中、低三個濃度的大蒜揮發(fā)油（92.6、46.3、23.2mg/bw·kg·d）干預，陰性對照組和糖尿病模型組給予1％吐溫-80灌胃，實驗結束后根據(jù)動物血糖值、糖耐量實驗結果以及各項血生化指標的測定，評價大蒜揮發(fā)油對糖尿病小鼠的輔助降血糖作用。（6）體外通過MTT法檢測不同濃度大

4、蒜揮發(fā)油（200、100、50、25、12.5、6.3、3.1mg/L）對乳鼠心肌微血管內皮細胞缺氧/復氧損傷的保護性作用，根據(jù)細胞形態(tài)學變化、細胞存活率及其抗凋亡作用對大蒜揮發(fā)油的細胞損傷保護作用進行研究。
　　 研究結果：（1）影響大蒜揮發(fā)油提取率的主要因素為蒸餾時間，其次為加水量、發(fā)酵溫度、浸泡時間，最佳提取工藝條件為發(fā)酵溫摩35℃、浸泡時間4h、加水量3.5倍、蒸餾時間2h，在此條件下?lián)]發(fā)油提取率為0.35％。（2）大蒜

5、揮發(fā)油經氣相色譜-質譜聯(lián)用儀分析，共分離出25個峰，鑒定出18個化合物，占揮發(fā)油總量的95.09％，其中含硫化合物16種，占揮發(fā)油總量的92.96％；經分析，大蒜揮發(fā)油中大蒜素的線性范圍為0.036～0.576mg/ml，方法重復性RSD為0.56％，平均回收率為95.61％，在大蒜揮發(fā)油中含量為121.17mg/100g。（3）大蒜揮發(fā)油對金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、福氏志賀菌等5種細菌有抑制作用，但對乙型副

6、傷寒沙門氏菌無效。（4）通過對高脂血癥大鼠的降脂減肥作用研究發(fā)現(xiàn)，大蒜揮發(fā)油具有降低實驗動物體重、體內脂肪含量、脂體比、動脈硬化指數(shù)、Lee's指數(shù)、血清總膽固醇（TC）水平和升高血清中高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平等作用，但對降低血清中甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）效果不理想。（5）給予糖尿病小鼠大蒜揮發(fā)油干預后，其高劑量組降低實驗動物糖化血清蛋白（GSP）、尿素氮（BUN）、TG、TC水平、肝臟、腎臟指數(shù)以

7、及血糖、糖耐量等各項指標結果顯示差異均具有顯著性。（6）通過原代培養(yǎng)乳鼠心肌微血管內皮細胞，建立細胞缺氧/復氧損傷模型，進而評價大蒜揮發(fā)油對心肌微血管內皮細胞缺氧/復氧損傷的保護作用，根據(jù)細胞形態(tài)學變化、細胞存活率及其抗凋亡作用，顯示大蒜揮發(fā)油濃度為12.5mg/L時細胞存活率最高。
　　 結論：（1）水蒸氣蒸餾法提取大蒜揮發(fā)油的最佳提取工藝條件大大提高了大蒜揮發(fā)油的提取率，簡單安全、不污染環(huán)境、適用于工業(yè)生產。（2）利用氣-質

8、聯(lián)用分析大蒜揮發(fā)油的主要成分，豐富了國內外對于大蒜揮發(fā)油的成分研究，為進一步利用打下了基礎；氣相色譜內標法測定大蒜揮發(fā)油中大蒜素的方法簡便，準確，重復性好，可用來測定大蒜揮發(fā)油中大蒜素含量。（3）大蒜揮發(fā)油對革蘭氏陽性菌中的金黃色葡萄球菌和革蘭氏陰性菌中的綠膿桿菌的抑殺效果較好，而對乙型副傷寒沙門氏菌不具有抑菌和殺菌能力。（4）不同濃度的大蒜揮發(fā)油對高脂血癥大鼠的各項指標均有一定的影響，尤以高劑量組效果最為明顯，提示大蒜揮發(fā)油具有降脂減