人結(jié)腸癌組織中B7-H4的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：觀察人結(jié)腸癌組織中B7-H4分子的表達水平，并初步探討B(tài)7-H4的表達與調(diào)節(jié)性T細胞及白細胞介素10 之間的聯(lián)系。
　　 方法：收集華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院胃腸外科結(jié)腸癌手術(shù)標本60例（經(jīng)病理證實）。通過免疫組織化學(xué)和流式細胞分析方法，檢測癌組織與癌旁正常組織中B7-H4的表達水平；通過流式細胞分析方法檢測癌組織與癌旁正常組織中調(diào)節(jié)性T細胞（CD4+CD25+regulatory T cells，Tregs）的含

2、量；利用免疫磁珠分選試劑盒分選組織與健康人外周血來源的調(diào)節(jié)性T細胞與效應(yīng)性T細胞(CD4+CD25-conventional T cells，Tcons)，蛋白印跡（Western blotting）與流式細胞分析法檢測兩者中白細胞介素-10的含量；利用免疫磁珠分選試劑盒分選癌組織中的調(diào)節(jié)性T細胞，并與健康人外周血單核細胞（PBMC）共培養(yǎng)48h，觀察調(diào)節(jié)性T細胞對單核細胞上B7-H4的誘導(dǎo)表達影響。
　　 結(jié)果：1.免疫組織化

3、學(xué)顯示B7-H4在癌組織中表達明顯，而癌旁正常組織幾乎無B7-H4表達；流式細胞分析顯示，癌組織B7中-H4的陽性表達率為62±8％，對應(yīng)的平均熒光強度（MFI）為2480±320；而癌旁正常組織中為10±2％，MFI 為400±80；兩者表達水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而且B7-H4是在腫瘤相關(guān)浸潤巨噬細胞（TAM）上表達。
　　 2.流式細胞分析顯示，F(xiàn)oxp3(調(diào)節(jié)性T細胞表面標志)在癌組織和癌旁正常組織CD3+

4、CD4+T細胞中陽性表達比例分別占22±5％和5±3％（P<0.05）；
　　 3.蛋白印跡顯示，調(diào)節(jié)性T細胞的IL-10 含量明顯高于同源效應(yīng)性T細胞；同時，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）顯示培養(yǎng)調(diào)節(jié)性T細胞與效應(yīng)T細胞的清液中IL-10的濃度分別為200±25pg/ml和50±8pg/ml，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)義；
　　 4.B7-H4 體外誘導(dǎo)顯示，將單核細胞與調(diào)節(jié)性T細胞共培養(yǎng)48h后，其B7-H4陽性表達率達40±5