氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定人血漿中雙氯芬酸鈉的含量.pdf

1、目的：雙氯芬酸鈉是一種非甾體抗炎藥物，具有解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎作用。雙氯芬酸鈉作用機(jī)制為抑制環(huán)氧化酶活性，從而阻斷花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素。同時(shí)，它也能促進(jìn)花生四烯酸與甘油三脂(三酰甘油)結(jié)合，降低細(xì)胞內(nèi)游離的花生四烯酸濃度，從而間接抑制白三烯的合成。由于雙氯芬酸鈉具有作用快、藥效強(qiáng)、吸收好、用量小、個(gè)體差異小、副作用小等特點(diǎn)，被廣泛用于臨床。因此，有必要加強(qiáng)對(duì)其的監(jiān)控。本文旨在應(yīng)用兩種不同的前處理方法—液液萃取(LLE)和固相萃取(SPE

2、)，建立起一種快速、靈敏、專屬的測(cè)定人血漿中雙氯芬酸鈉含量的GC—MS方法。 方法：1.儀器采用島津氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC/MS—QP2010)；TD24—WS臺(tái)式離心機(jī)、DELTA302 pH計(jì)、LG WD700(MG5055M)微波爐；雙氯芬酸鈉對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，100334—200302)，布洛芬對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，100179—200302)，1，3，5—三溴苯(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；N

3、，O—雙(三甲基硅)三氟乙酰胺(BSTFA)標(biāo)準(zhǔn)溶液(北京市公安部二所)，七氟丁酰氯(HFB—C1)標(biāo)準(zhǔn)溶液(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)；硅藻土(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)；空白血漿(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血庫(kù)提供)；無水乙醇、乙醚、正己烷、丙酸丁酯。2.實(shí)驗(yàn)步驟：(1)血漿樣品經(jīng)酸性反提，萃取物在微波加熱條件下進(jìn)行硅烷衍生化(TMS)處理后進(jìn)樣GC—MS分析。通過質(zhì)譜選擇離子掃描模式(SIM)分析，供試品雙氯芬酸鈉TMS衍生物定量選擇性正離

4、子檢測(cè)質(zhì)荷比為m/z367，內(nèi)標(biāo)物布洛芬TMS衍生物定量選擇性正離子檢測(cè)質(zhì)荷比為m/z263。(2)血漿樣品經(jīng)固相萃取后進(jìn)樣GC—MS分析，通過質(zhì)譜選擇離子掃描模式(SIM)分析，供試品雙氯芬酸內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)定量選擇性正離子檢測(cè)質(zhì)荷比為m/z214，內(nèi)標(biāo)物1，3，5—三溴苯定量選擇性正離子檢測(cè)質(zhì)荷比為m/z314。 結(jié)果：1.使用LLE和SPE方法對(duì)雙氯芬酸鈉進(jìn)行前處理，分別得到雙氯芬酸三甲基硅烷產(chǎn)物和雙氯芬酸內(nèi)酰胺產(chǎn)物，這兩種目標(biāo)

5、分析產(chǎn)物都是揮發(fā)性好，熱穩(wěn)定性強(qiáng)的化合物，在色譜系統(tǒng)中與合適的內(nèi)標(biāo)能達(dá)到很好的分離，因此適合進(jìn)行GC—MS分析。2.分析過程中，空白血漿對(duì)待測(cè)樣品無明顯干擾。(1)內(nèi)標(biāo)與供試品保留時(shí)間分別為7.977 min和12.470 min；雙氯芬酸鈉血漿藥物濃度在0.005～10μgml/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9997)，最低檢出限為0.5 ngml/L；方法回收率在94％～98％之間，日內(nèi)、日間RSD均小于5％。(2)內(nèi)標(biāo)與供試品保留