兒童急性白血病微小殘留病檢測方法及臨床應用.pdf

1、目的：近20年來，隨著白血病診治水平的提高，兒童急性白血病完全緩解率明顯提高，長期無病生存時間顯著延長，但仍有約30％的患兒最終復發(fā)。近10年研究表明，緩解期體內微小殘留病（MRD）是導致復發(fā)從而影響患兒長期生存的主要因素。通過文獻綜述，探討兒童急性白血病MRD的檢測方法，從而為評估早期治療效果、進行危險度分類、指導白血病的治療、評估骨髓移植的凈化效果提供依據。
　　 方法：通過應用CNKI中文數據庫、中國生物醫(yī)學文獻數據庫、P

2、ubMed和Highwire press外文全文數據庫進行文獻的檢索。
　　 結果：檢測MRD的方法較多，關鍵是能否檢出混雜在正常造血細胞中殘留的微量白血病細胞。近20年來的細胞生物學研究已經顯示當體內白血病細胞總數低于106時（重量低于1mg），有可能依靠機體自身的免疫保護機制清除體內殘存的白血病細胞（即MRD），因此適合于MRD檢測技術的敏感性至少需達到10-4，而傳統(tǒng)形態(tài)學、細胞遺傳學方法以及熒光原位雜交技術（FISH）的

3、靈敏度依次是5×10-2、10-1～10-2和10-2～10-3，因此臨床應用受到限制隨著分子生物學和分子免疫學發(fā)展起來的流式細胞術（FCM）及定量PCR技術，使MRD檢測的靈敏度大大提高。FCM通過檢測白血病細胞相關抗原表型（LAIP）鑒別白血病細胞，根據患兒初診時異常表型特點確定隨訪時的抗體組合，通常選擇一種或一種以上的組合進行檢測，敏感度可達10-1～10-6。PCR技術主要通過檢測腫瘤特異序列包括白血病細胞特殊的抗原受體基因重排

4、、染色體易位和融合基因來檢測MRD，敏感度為10-4～10-6，可對85％的急性淋巴細胞白血?。ˋLL）及30％的急性髓細胞性白血?。ˋML）患兒進行MRD檢測。大量臨床研究證實，MRD的有無及高低不但反映了化療的效果，而且與預后密切相關，并且連續(xù)的MRD監(jiān)測可提供更多的預后信息。MRD檢測還可以進行危險度的分類，從而為個體化治療策略的制定提供依據。此外，對移植前患兒體內MRD進行定量檢測可以預測骨髓移植后復發(fā)的風險。
　　 結