熊果酸對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株SW1990的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究熊果酸(ursolic acid,UA)對(duì)人胰腺癌細(xì)胞SW1990的生長(zhǎng)抑制作用，并探討其作用機(jī)制。 方法：用不同濃度的UA處理人胰腺癌細(xì)胞SW1990，采用MTT法測(cè)定UA對(duì)SW1990細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用、流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期改變和細(xì)胞凋亡；Hoechst33258熒光染色、透射電鏡等方法觀察給藥前后細(xì)胞的形態(tài)變化；RT-PCR檢測(cè)UA處理SW1990細(xì)胞前后的基因表達(dá)水平變化；同時(shí)引入p53的抑制劑PFT-α(p

2、ifithrinalpha，PFT-α)做對(duì)照研究。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)胰腺癌中P53和Bcl-2的表達(dá)情況。 結(jié)果：UA對(duì)SW1990細(xì)胞生長(zhǎng)具有顯著的抑制作用，且此作用呈明顯的時(shí)間、劑量依賴趨勢(shì)。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，UA可以誘導(dǎo)人胰腺癌SW1990細(xì)胞凋亡，引起細(xì)胞發(fā)生S期阻滯；Hoechst33258熒光染色、透射電鏡觀察證實(shí)UA可以誘導(dǎo)SW1990細(xì)胞發(fā)生凋亡。RT-PCR分析結(jié)果顯示UA(40μmol/L)作用

3、于胰腺癌SW1990細(xì)胞，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，上調(diào)p53、cytochrome C、caspase-3的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2表達(dá)。用p53的抑制劑PFT-α預(yù)處NsW1990細(xì)胞后再給予UA處理，細(xì)胞凋亡現(xiàn)象受到抑制，RT-PCR結(jié)果顯示下調(diào)p53、cytochrome C、caspase-3的表達(dá)，上調(diào)Bcl-2表達(dá)。免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)結(jié)果顯示胰腺癌中存在著高頻率的p53突變。 結(jié)論：UA能明顯抑制人胰腺癌SW1