胃癌組織中Caveolin-1基因外顯子2及Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化狀態(tài)檢測(cè).pdf

1、目的:檢測(cè)胃癌組織中Caveolin-1基因外顯子2啟動(dòng)子區(qū)域及Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島的甲基化狀態(tài)，探討Caveolin-1基因及Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島甲基化在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其與臨床病理特征的關(guān)系。 方法:收集胃癌組織及距腫瘤5㎝以上的癌旁正常胃組織，運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提法提取組織中基因組DNA，采用DNA修飾試劑盒(CpGenome DNA Modifi

2、cation Kit)對(duì)DNA進(jìn)行修飾后分別以甲基化特異性引物及非甲基化引物進(jìn)行PCR，通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳及產(chǎn)物測(cè)序判定結(jié)果。 結(jié)果: 1.6例正常胃組織標(biāo)本Caveolin-1基因外顯子2啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島均為甲基化陰性。30例胃癌組織標(biāo)本中，27例標(biāo)本甲基化陽(yáng)性，甲基化率為90％，其中16例癌組織(53.3％)表現(xiàn)為完全甲基化，11例癌組織(36.7％)表現(xiàn)為部分甲基化，3例標(biāo)本表現(xiàn)為甲基化陰性。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示

3、胃癌組織中Caveolin-1基因外顯子2啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島甲基化率顯著高于正常組織(p<0.05)。 2.經(jīng)Fisher確切概率法檢驗(yàn)，胃癌組織中Caveolin-1基因外顯子2啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島甲基化狀態(tài)與胃癌組織分化程度、患者年齡、性別、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無(wú)脈管侵犯等臨床病理特征無(wú)關(guān)(p>0.05)。 3.5例正常胃組織Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島均為甲基化陰性。

4、33例胃癌組織中，29例甲基化陽(yáng)性，甲基化率為87.9％，其中20例癌組織(60.6％)表現(xiàn)為完全甲基化，9例癌組織(27.3％)表現(xiàn)為部分甲基化，4例癌組織(12.1％)表現(xiàn)為甲基化陰性。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示癌組織中Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島甲基化率顯著高于正常組織。 4.經(jīng)Fisher確切概率法檢驗(yàn)，胃癌組織中Caveolin-2基因啟動(dòng)子區(qū)域5’端CpG島甲基化狀態(tài)與胃癌組織分化程度、患者年齡、性別、腫瘤大