大鼠前扣帶皮層內(nèi)去抑制的初步探索：痛情緒調控的可能機制.pdf

1、去抑制(disinhibition)可使中樞神經(jīng)元興奮性增高，參與學習記憶、藥物成癮、慢性痛等重要的生理、病理過程。去抑制在痛覺調制中的作用逐漸被認識。疼痛包括感覺分辨和情緒體驗兩種成分，痛情緒給病人帶來無盡的情感折磨。大量研究提示前扣帶皮層(ACC)在痛情緒中發(fā)揮重要作用，現(xiàn)有研究多著眼于谷氨酸介導的興奮性系統(tǒng)，而有關ACC內(nèi)去抑制的研究至今鮮有報道。
　　 本研究采用腦薄片全細胞膜片鉗技術結合動物行為學方法對ACC內(nèi)去抑制的

2、功能及可能機制進行初步探索，得到以下主要結果：
　　 1.首次觀察到去除GABAA受體介導的抑制作用顯著增強ACC內(nèi)的多突觸興奮性傳遞。正常外液灌流時，電刺激ACC腦片第Ⅱ/Ⅲ層，可在第V層錐體細胞上引起潛伏期短且恒定的單突觸反應，稱之為“早反應”。在灌流液中加入GABAA受體拮抗劑bicuculline(10μM)去除GABAA受體介導的抑制作用，四分鐘后同樣的刺激可引起潛伏期較長且不恒定的“晚反應”，繼續(xù)灌流bicucull

3、ine，“晚反應”還會進一步增大。高濃度二價陽離子(4.2 mM Mg2+，7.0 mM Ca2+)的外液可阻斷“晚反應”，并且“晚反應”不能跟隨較高頻率的電刺激，這說明“晚反應”為多突觸反應。GABAB受體拮抗劑saclofen(250μM)或甘氨酸受體拮抗劑strychnine(0.5μM)均不能引起與bicuculline相似的效應。藥理學分析顯示，“早反應”和“晚反應”均可被谷氨酸受體拮抗劑DNQX(10μM)和AP-V(50μ

4、M)所阻斷，表明去除ACC內(nèi)GABAA受體介導的抑制作用可大大增強ACC內(nèi)的興奮性突觸傳遞。
　　 2.為進一步分析GABA去抑制在痛情緒調控中的作用，本研究采用動物行為學方法，在大鼠福爾馬林誘導的條件位置回避(F-CPA)模型上，觀察ACC內(nèi)微量注射GABAA受體激動劑muscimol對痛情緒反應的影響。對照組動物訓練后對福爾馬林匹配室產(chǎn)生明顯回避，回避分數(shù)為191±44s(n=8)。福爾馬林訓練前，在ACC內(nèi)微量注射musc

5、imol(10 mM，0.6μL)可阻斷F-CPA的形成，回避分數(shù)為-4±25s(n=8)；但muscimol對福爾馬林引起的急性痛行為沒有明顯影響。這提示ACC內(nèi)GABA能去抑制可能參與痛厭惡情緒的誘導。
　　 3.首次觀察到多巴胺通過D2受體和突觸后機制抑制ACC第V層錐體細胞上的抑制性突觸后電流(IPSC)。用谷氨酸受體拮抗劑DNQX(10μM)和AP-V(50μM)阻斷興奮性傳遞后，在ACC腦片第Ⅱ/Ⅲ層給予刺激可在第Ⅴ

6、層錐體細胞上記錄到抑制性突觸后電流(IPSC)，此IPSC可被bicuculline(10μM)阻斷。灌流給予多巴胺(50μM)可抑制IPSC幅度至對照水平的70.7±7.1％(n=14)。D2受體激動劑quinpirole(10μM)也可抑制IPSC，而D1受體激動劑SKF38393(10μM)對IPSC沒有明顯影響；同時，多巴胺對IPSC的抑制作用可被D2受體拮抗劑eticlopride(5μM)所阻斷，而D1受體拮抗劑SCH233

7、90(10μM)則不能翻轉多巴胺對IPSC的抑制作用，這些結果顯示多巴胺通過D2受體抑制IPSC。此外，多巴胺可抑制局部給予GABA誘導的電流，而多巴胺對配對刺激所引起反應的幅度之比率沒有影響，這提示多巴胺通過突觸后機制抑制IPSC。
　　 綜合以上結果可得出以下結論：ACC內(nèi)GABA能去抑制可增強ACC內(nèi)的多突觸興奮性傳遞，并可能參與痛相關情緒的形成；多巴胺通過D2受體和突觸后機制抑制ACC第V層錐體神經(jīng)元的IPSC，這可能為