低砷染毒對小鼠肝臟砷代謝酶基因轉錄水平和脂質過氧化損傷的影響.pdf

1、目的： 1.動態(tài)觀察低劑量砷染毒小鼠肝臟砷代謝相關酶基因表達水平的變化；2.動態(tài)觀察低劑量砷染毒小鼠致肝臟損傷及脂質過氧化情況。 方法： 將96只健康雄性KM小鼠隨機分成4組,實驗受試物為亞砷酸鈉,通過飲水途徑染毒。染毒組分為50μg/L、500μg/L、5000μg/L三個劑量,并且同時設陰性對照組,每個劑量組分三個染毒時間段,分別為4周、6周和8周,在各自的染毒時間結束后,處死小鼠。觀察指標為：飲水量、飼料消

2、耗量、體重、主要的臟器系數(shù)；原子熒光吸收光譜法測血、肝臟和腎臟的總砷含量；肝臟脂質過氧化產物丙二醛(MDA)、肝臟過氧化物岐化酶(SOD)活性、肝臟谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性以及用RT-PCR法測肝臟砷代謝相關酶(PNP、GSTO、AS3MT)的基因表達水平。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行方差分析。 結果： 1.一般毒性：染毒組和對照組相比,飲水量、飼料消耗量都無明顯差異(P＞0.05);體重在低、中劑量染

3、毒4周明顯增高,高劑量組8周則顯著降低。肝臟和腎臟系數(shù)均是隨染毒時間和染毒劑量的增加出現(xiàn)先增高后降低的現(xiàn)象,有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。脾臟和心臟系數(shù)均隨染毒時間和染毒劑量的增加而增加(P＜0.05),腦系數(shù)無明顯變化(P＞0.05),肺臟系數(shù)在中劑量有明顯增高(P＜0.05),低、高劑量則無明顯變化(P＞0.05)。 2.小鼠體內砷含量變化：血砷、肝砷、腎砷含量隨著染毒時間和染毒劑量的增加而逐漸增高,但是在短時間染毒差異沒有

4、統(tǒng)計學意義(P＞0.05),隨著時間延長,在低、中、高劑量組砷含量逐漸增高,且有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。砷主要蓄積在肝臟,其次是血液,腎臟碑含量遠低于肝和血。三者的變化趨勢一致。 3.小鼠肝臟脂質過氧化:MDA含量隨染毒時間和染毒劑量的增加而增高,有顯著性差異(P＜0.05);SOD活性和GSH-Px活性則是隨著染毒時間和染毒劑量的增加出現(xiàn)先增高后降低的現(xiàn)象,其增高均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。GSH-Px活性降低與對照組

5、之間有顯著性差異(P＜0.05),而SOD活性降低與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)。 4.小鼠肝臟砷代謝酶基因表達水平:PNP基因表達水平隨染毒時間和染毒劑量的增加沒有明顯的變化(P＞0.05);AS3MT和GSTO基因表達水平隨著染毒時間的增加沒有統(tǒng)計學意義；染毒組與同期對照組相比,隨劑量增加,AS3MT和GSTO基因表達量增高,在中、高劑量組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 5.脂質過氧化和代謝酶基因表達的相關性

6、分析:MDA與AS3MT和GSTO呈正相關,相關系數(shù)分別為0.510和0.443。GSH-Px活性則與AS3MT和GSTO呈負相關,相關系數(shù)分別為-0.558和-0.408。MDA和GSH-Px與PNP均無相關性,SOD活性與PNP、AS3MT、GSTO均無相關性。 結論： 1.低砷可以誘導小鼠肝腎的抗氧化損傷系統(tǒng)出現(xiàn)適應性的增高,隨著劑量和作用時間增加最終會造成小鼠的氧化損傷。 2.低砷可以誘導AS3MT、GS