蓮子心中黃酮類物質與生物堿的分離純化工藝研究.pdf

1、蓮子心(Plumula Nelumubinis)為睡蓮科蓮屬植物蓮(Nelumbonucifera Gaertn)成熟種子中的綠色幼葉及胚根，是一種常用藥材。蓮子心中含生物堿、黃酮、多糖及揮發(fā)油等多種活性物質，具有降壓、抗心律失常、降血糖、逆轉腫瘤多藥耐藥、抗氧化等藥理活性，在臨床治療及預防保健方面具有廣泛的應用價值。以往對蓮子心的研究主要集中在生物堿類物質的提取分離純化及藥理活性，而對蓮子心黃酮類物質的研究較少，未能將蓮子心資源充分利

2、用。更重要的是，對蓮子心中生物堿的分離常使用有毒的有機溶劑，處理繁瑣，對環(huán)境及人身危害較大，不適合大規(guī)模工業(yè)生產。為了充分利用蓮子心資源，克服現(xiàn)有工藝的缺點，本課題建立了一種在純化蓮子心生物堿的同時，富集蓮子心中黃酮類物質的方法，主要研究內容與所得結果如下：
　　 1.ZTC1+1-Ⅱ型澄清劑應用于蓮子心提取液的除雜工藝研究
　　 應用ZTC1+1-Ⅱ型澄清劑處理蓮子心提取液，以去除葉綠素、粘液質、蛋白質、鞣質等雜質。以

3、Nef保留率及固形物去除率為指標，在單因素實驗的基礎上，運用正交實驗設計，優(yōu)化工藝條件。在藥液濃度為1:6，在80℃下先加入澄清劑B組分0.8 mL·g-1，攪拌10 min后保溫30 min；再加入A組分0.4 mL·g-1，攪拌10 min后保溫30 min的工藝條件下，固形物去除率為22.81％、甲基蓮心堿含量保留率為89.42％。采用ZTC1+1-Ⅱ型澄清劑對蓮子心提取液進行預處理，可以起到較好的除雜效果。
　　 2.殼

4、聚糖對蓮子心提取液的除雜工藝研究
　　 采用殼聚糖作為澄清劑處理蓮子心提取液，以固形物去除率、甲基蓮心堿保留率為指標，在單因素分析的基礎上采用正交實驗設計及響應面法Box-Benhnken中心組合實驗設計對比優(yōu)化了除雜工藝條件。結果表明在蓮子心提取液藥液比為1:5或1:5.5，殼聚糖加入量為1.2 mL·g-1，作用溫度為60℃，pH值為6.2的工藝條件下，固形物去除率約為22％，Nef保留率約為90％。正交實驗設計與響應面法優(yōu)

5、化的工藝條件差別不大。
　　 3.離子交換樹脂同步分離和富集蓮子心中黃酮類物質與生物堿
　　 采用靜態(tài)吸附和動態(tài)吸附相結合的方法，篩選了幾種不同性質的陽離子交換樹脂，最終確立了4撐大孔陽離子交換樹脂分離和富集蓮子心中黃酮類物質與生物堿的工藝：稱取20.00g(約30mL)已處理好的樹脂，純化水濕法裝柱(直徑16mm，高150mm)，分別吸取藥液比為1:6的蓮子心除雜液240mL(8BV)上柱，依次用5BV純化水洗去雜質，

6、10BV70％乙醇洗脫黃酮類物質，7BV0.02 g·mL-1NaCl-70％乙醇洗脫生物堿，流速為2BV·h-1。研究結果表明，純化后黃酮和生物堿純度大大提高，精制倍數(shù)可分別達27.08倍及9.48倍，洗脫率分別為84.28％及88.84％。表明該工藝較為穩(wěn)定可靠，且分離富集效果顯著。
　　 4.蓮子心中黃酮類物質的純化與結構表征
　　 利用聚酰胺柱層析對分離后的總黃酮進行分步梯度洗脫，得到20％、30％、40％、50