血紅蛋白測定參考方法的評價(jià)與氰化高鐵血紅蛋白候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制.pdf

1、目的：血紅蛋白是臨床常用檢測指標(biāo)，其檢測方法多種多樣，不同方法的檢測結(jié)果必須溯源至血紅蛋白參考方法才能保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)于1967年確定了血紅蛋白的參考方法，至今該方法已修訂三次，儀器、試劑、操作程序等都有改變，本實(shí)驗(yàn)室按照ICSH的要求建立了血紅蛋白測定的參考方法，為了驗(yàn)證血紅蛋白參考方法用于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的可行性，我們對血紅蛋白測定參考方法的性能進(jìn)行了評價(jià)。 氰化高鐵血紅蛋白(H

2、iCN)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對于檢測結(jié)果的量值傳遞有重要意義，許多國家和組織都制備了各自的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如歐盟標(biāo)準(zhǔn)署(BCR)制備了HiCN標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)CRM 522。文獻(xiàn)檢索表明，國內(nèi)尚無HiCN一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，雖然有經(jīng)計(jì)量部門批準(zhǔn)的HiCN二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，但目前研制部門均已不生產(chǎn)。為了解決使用HiCN進(jìn)行溯源的問題，我們按照《一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范》的要求研制了HiCN候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。 方法：確認(rèn)分光光度計(jì)的性能可滿足血紅蛋白參考方法的要求，確定參考測

3、量程序；參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)文件EP6-P2和EP5-A評價(jià)該方法的線性和精密度，通過測定WHO國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)驗(yàn)證我室血紅蛋白參考方法測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。 參考ICSH國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法制備HiCN候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)300瓶；按照ISO Guide35的要求評價(jià)候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性、穩(wěn)定性，在均勻性、穩(wěn)定性合乎要求的前提下由多個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用多臺經(jīng)過嚴(yán)格校準(zhǔn)的儀器為HiCN候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值。 結(jié)果：在測量范

4、圍內(nèi)參考方法精密度評價(jià)結(jié)果：變異系數(shù)變化范圍0.12～0.32％；在血紅蛋白濃度70～270 g/L范圍內(nèi)，參考方法的測定值與預(yù)期值的線性相關(guān)系數(shù)為1.000，斜率為1.001；用U-3000和U-3310型分光光度計(jì)測定WHO國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的結(jié)果與定值的相對偏差分別為-0.01％和-0.35％。 按照ISO Guide35計(jì)算HiCN候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性的不確定度為0.0004 g/L，CV為0.09％(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性檢

5、測結(jié)果的CV為0.09％)；當(dāng)效期為1年時(shí)，長期穩(wěn)定性的不確定度為0.0006 g/L；HiCN定值結(jié)果為0.6159 g/L(相當(dāng)于251倍稀釋的新鮮血血紅蛋白濃度為154.7g/L)，不確定度為0.0004 g/L；當(dāng)擴(kuò)展因子取2時(shí)，候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的擴(kuò)展不確定度為0.0018 g/L；如果按照WHO的HiCN國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值不確定度計(jì)算方法，候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度為0.0012 g/L(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度為0.0013g/