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文檔簡介
1、半夏為天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit的干燥塊莖,具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結等功效。據統(tǒng)計在558種中藥處方中,半夏的使用頻率居第22位。其藥理作用廣泛,是一味重要的中藥。但半夏各成分含量較低,有效成分不明確,對于半夏因加工處理方法不同引起的質量上的巨大差異一直沒有引起足夠的注意,長期以來半夏加工沒有科學統(tǒng)一的標準,又由于種質資源、產地、采收時間的不同,半夏藥材的品質存在很大差異,嚴重影響
2、其臨床療效。本文以從各地收集的干、鮮品半夏作為研究對象,分別采用等電聚焦電泳法、氣相色譜法、反相高效液相色譜法對這些樣品進行測定分析,探索半夏種質資源鑒定方法及不同加工處理方法對其化學成分的影響,為半夏種質資源鑒定和質量標準研究奠定基礎。 本文對不同產地、不同成熟期和發(fā)芽期的半夏種質材料進行蛋白質等電聚焦電泳比較分析。該技術是通過加入兩性電解質,形成較平滑pH梯度,使樣品蛋白質在等電點處停止電泳。含有不同蛋白質成分的各種中藥材可
3、應用等電聚焦電泳技術對其進行質量分析與鑒定。為減少昂貴的試劑用量并用普通的電泳設備即可完成等電聚焦電泳,我們應用了改進的等電聚焦技術,效果好,重現(xiàn)性好。實驗結果表明:雖然不同地區(qū)的半夏處于成熟期時其蛋白質IEF電泳譜是相同的,但處于發(fā)芽期的不同地區(qū)半夏的種植資源的IEF蛋白質電泳譜有顯著區(qū)別;同一地區(qū)(如荊州野生半夏)發(fā)芽期的每一粒半夏塊莖的IEF蛋白質電泳譜是相同的。因此,我們可以考慮用發(fā)芽期的半夏來鑒別不同地區(qū)或不同種質資源的半夏品
4、種。 本文采用氣相色譜法,對各個地區(qū)用不同方法加工的各種半夏樣品中所含的甾醇類成分進行了分析測定,結果表明:經70℃烘2h再以低溫烘干的全部鄂西半夏樣品,其所含的5個特有的甾醇類成分非常豐富和穩(wěn)定,且每個樣品中5個成分色譜峰的相似度很高。而未經適當高溫處理、烘干的半夏樣品,或直接自然曬干的半夏樣品,均未檢測到應有峰高的甾醇類成分或幾乎難以檢出相應的成分。我們對處于發(fā)芽期的半夏樣品也進行了測試,完全沒檢測到半夏中特有的甾醇類成分。
5、我們分析,半夏中的一些酶參與了半夏中甾醇類成分的代謝,發(fā)芽期時,酶特別活躍,物質代謝迅速,所以難以檢出甾醇類成分。低溫烘干和直接曬干的半夏藥材,其所含的多酚氧化酶類等未被破壞,只是因干燥過程抑制了部分活性,一旦溫度升高、空氣變潮,其所含的酶就開始活躍。未經適當高溫處理殺酶的半夏,在多酚氧化酶的作用下,會發(fā)生褐變甚至腐爛。有些人為防止這種現(xiàn)象,在半夏中常加入了一種名為焦亞硫酸鈉的防腐劑(一種容易引起癌癥的物質),嚴重影響了半夏藥材的質量。
6、本文采用藥典常規(guī)方法對其進行檢視,結果發(fā)現(xiàn):有些半夏樣品中確實含有焦亞硫酸鈉。低溫烘干和直接曬干的半夏藥材成分容易改變、極易腐爛,其原因與所含多酚氧化酶破壞有關。本文的研究結果揭示,半夏的加工方法對其品質和儲藏有著極為密切的關系。 對上述分析結果,本文還通過對半夏中水溶性成分的分析進行了證實。采用反相高效液相色譜法,以甲醇—水系統(tǒng)為流動相,檢測波長268nm,柱溫30℃,流速1.0mL·min-1,對不同方法加工的半夏樣品進行了
7、檢測。實驗結果表明:未經適當高溫殺酶處理的半夏及處于發(fā)芽期的鮮品半夏與經70℃烘2h再以低溫烘干的半夏及剛剛采挖的鮮品半夏相比較,其水溶性化學成分明顯減少。并且當有正確樣品和對照品時,還可以用本文建立的HPLC色譜法對半夏水溶性指紋圖譜作進一步分析研究。 最后,采用閾下和閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠法,考察了經適當高溫處理的鄂西半夏的鎮(zhèn)靜活性的強度與活性部位。結果表明:半夏醇提物乙酸乙酯部位與總的醇提物及醇提物的正丁醇部位相比,
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