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文檔簡介
1、運用高密度寡核苷酸芯片建立大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)12.5,E15.5,E18.5,新生和成年)的基因表達譜,經(jīng)過生物信息學數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)許多與胰腺功能相關的基因在E18.5相對高表達,這一時期正是形成典型胰島結構的關鍵階段,而典型的胰島結構是胰腺發(fā)揮正常生物學功能的基礎。本研究從基因表達譜中篩選出一條在E15.5和E18.5相對高表達的基因-WFS1,旨在初步探討該基因在胰島形成與功能完善中的作用。 運用RT-PCR技術
2、進一步檢測WFS1在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的mRNA表達水平;應用免疫印跡檢測不同時期WFS1蛋白表達;運用免疫組織化學檢測不同時期WFS1蛋白在胰腺的定位。RT-PCR與基因芯片中檢測的mRNA表達趨勢一致,表達量胚胎期高于新生和成年期;免疫印跡結果顯示W(wǎng)FS1蛋白在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的表達趨勢與mRNA表達趨勢基本相同;免疫熒光結果顯示在不同發(fā)育時期WFS1不僅在胰島β細胞有表達,而且在間充質細胞也有表達。 基于以上實驗結果
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