復元愈肝膠囊對脂肪肝大鼠影響的實驗研究.pdf

1、目的 復元愈肝膠囊以中醫(yī)理論為指導，結合現代藥理學成果而創(chuàng)制，在臨床應用中對多種原因引起的脂肪肝療效顯著，為闡明其藥理作用，探討其作用機制，本課題觀察復元愈肝膠囊對脂肪肝模型大鼠的防治作用，為臨床提供科學依據，并為進一步研究和新藥開發(fā)打下良好的基礎。 方法 健康雄性Wistar大鼠65只，飼養(yǎng)于18℃-22℃、明暗各12小時的清潔級動物實驗室內。正常喂養(yǎng)1周后隨機分為兩組：模型組(55只)和正常對照組(10只)。

2、模型組飼以高脂高膽固醇飼料；正常對照組(簡稱正常組)飼基礎飼料，各組均自由進水。8周后，從模型組隨機抽取5只，10％水合氯醛溶液行腹腔麻醉，取血查血脂，處死取肝臟做病理切片，驗證造模是否成功。50只造模成功大鼠，再隨機分為復元愈肝膠囊低劑量組、中劑量組、高劑量組(分別簡稱復低組、復中組、復高組；灌胃濃度依次為0.2、0.4、0.8g/ml)及東寶肝泰組(簡稱對照組；灌胃濃度為90mg/ml)與模型對照組(簡稱模型組)，每組10只。復元愈

3、肝膠囊組及東寶肝泰組各以其混懸液按1ml/100g/d灌胃；正常對照組及模型對照組各以同等容積蒸餾水灌胃；各組均喂飼基礎飼料，共4周。實驗過程中觀察大鼠一般情況。自實驗正式開始后12周末，于最后1次給藥禁食12h后麻醉狀態(tài)下從眶靜脈采血后處死，迅速按常規(guī)分離血清，剪取部分肝組織，肉眼觀察大鼠肝組織形態(tài)，光鏡下觀察肝臟病理形態(tài)學變化；另取部分肝組織，70％乙醇固定，置于0-4℃冰箱待檢。應用全自動生化分析儀觀察各組動物的肝功能(ALT、A

4、ST)、血脂(TG、TC)及血糖(FBS)；應用放射免疫法測定血清胰島素含量，根據血清胰島素水平(FINS)及空腹血糖(FBS)水平，按照公式計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR)=(FBS×FINS)/22.5；運用流式細胞儀檢測大鼠肝細胞凋亡，免疫組織化學法檢測Bcl-2、Bax基因蛋白表達。 結果 1與模型對照組相比，復元愈肝膠囊低、中、高劑量組能顯著降低血脂，改善肝功能(P＜0.05)，明顯優(yōu)于東寶肝泰對照組(P＜

5、0.05)。與正常組比較，模型組的空腹血糖、胰島素、胰島素抵抗指數呈增高趨勢，但差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。模型對照組大鼠肝細胞凋亡程度明顯高于各用藥組及正常對照組(P＜0.05)；各用藥組與模型對照組比較，肝細胞的凋亡率明顯下降(P＜0.05)，Bcl-2基因蛋白表達量增高(P＜0.05)，Bax基因蛋白表達量降低(P＜0.05)。 2一般情況觀察：正常組大鼠毛發(fā)光澤，體態(tài)活潑，反應敏捷，食量、排泄物均正常。模型組大鼠

6、毛發(fā)欠光澤，活動減少，糞便時稀軟。各用藥組大鼠毛發(fā)、體態(tài)、反應、食量、排泄物基本正常。模型組前2周進食量減少，體重增長較正常組稍緩慢，可能與不適應高脂飼料有關。以后各組大鼠體重增長速度接近，實驗結束時各組大鼠體重均無顯著差異(P＞0.05)。 3大鼠肝臟外觀形態(tài)學變化：正常組大鼠肝臟外觀顏色鮮紅、邊緣銳利、質韌；模型組大鼠腹腔脂肪組織明顯增多，肝臟體積明顯增大，包膜緊張，邊緣變鈍，肝外觀呈奶油黃或紅黃相間，質地變軟，切面略帶油膩

7、感；復元愈肝膠囊各用藥組大鼠肝臟色澤、質地、外觀接近正常組；東寶肝泰組大鼠肝臟外觀較模型組改變不明顯。 4光鏡觀察大鼠肝臟病理形態(tài)學變化：正常對照組大鼠肝小葉清晰，肝細胞索排列整齊，偶見小泡性脂滴空泡；模型對照組肝小葉中心帶肝細胞中出現大小不等的脂肪滴，以大泡性脂肪滴為主，一些肝細胞核則被脂肪滴擠得明顯偏位，小葉內及匯管區(qū)灶性炎細胞浸潤，并伴有一定程度的點片狀壞死；復元愈肝膠囊各劑量組肝小葉和肝血竇結構清晰，細胞內可見少許小泡性