海馬電刺激對(duì)耐藥性顳葉癲癇大鼠腦組織GABAA受體α5、γ2亞單位的影響.pdf

1、目的：建立耐苯妥英鈉及苯巴比妥鈉的杏仁核點(diǎn)燃大鼠模型，對(duì)耐藥性癲癇大鼠進(jìn)行低頻海馬電刺激治療并評(píng)價(jià)其療效，繼而檢測(cè)γ-氨基丁酸A受體α5、γ2亞單位（GABAARα5,GABAARγ2）的表達(dá)，探討耐藥性癲癇及海馬電刺激的可能機(jī)制。
　　方法：選擇100只健康雄性 SD大鼠，通過(guò)杏仁核慢性電刺激，建立癲癇模型，分別予以苯妥英納及苯巴比妥鈉腹腔注射，以1小時(shí)后放電閾值（Afterdischarge threshold,ADT）變化為

2、指標(biāo)，篩選出耐藥癲癇大鼠，將篩選出的耐藥性癲癇大鼠分為耐藥對(duì)照組和海馬刺激組，對(duì)海馬刺激組進(jìn)行為期2周的低頻電刺激治療，對(duì)耐藥對(duì)照組進(jìn)行假性刺激，并選擇非耐藥癲癇大鼠進(jìn)行對(duì)照。進(jìn)行海馬刺激后觀測(cè)大鼠的行為學(xué)改變和腦電變化，以評(píng)價(jià)海馬電刺激的治療效果，治療結(jié)束后處死大鼠，取出三組大鼠海馬組織行實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blotting法檢測(cè)GABAARα5,GABAARγ2的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.模型制作情況：100只SD

3、大鼠，成功點(diǎn)燃62只，發(fā)作級(jí)別均為5級(jí)，點(diǎn)燃率62％。62只癲癇大鼠經(jīng)苯妥英納及苯巴比妥鈉篩選，篩選出耐藥性癲癇大鼠12只，耐藥率19.3%。成功建立了耐苯妥英鈉及苯巴比妥鈉的杏仁核點(diǎn)燃癲癇大鼠模型。
　　2.海馬電刺激的療效：經(jīng)海馬電刺激治療后，耐藥性癲癇大鼠發(fā)作級(jí)別（1例已無(wú)發(fā)作，2例降為2級(jí)發(fā)作，2例降為3級(jí)發(fā)作，1例尚有4級(jí)發(fā)作）降低、發(fā)作持續(xù)時(shí)間（治療前67.3±11.2s，治療后27.4±12.2s）縮短，ADT值（2

4、83.33±52.79）較治療前（136.67±29.44）明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療過(guò)程未出現(xiàn)明顯的并發(fā)癥，海馬電刺激治療耐藥性癲癇安全有效。
　　3.海馬電刺激對(duì)GABAA受體表達(dá)的影響：熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果表明，耐藥對(duì)照組GABAARα5mRNA,GABAARγ2mRNA（lg2-△△Ct：-0.17±0.34，-0.15±0.26）表達(dá)明顯減少，與藥物敏感組（lg2-△△Ct：0.49±0.27，0

5、.27±0.12）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；經(jīng)海馬刺激治療后，耐藥性癲癇大鼠 GABAARα5mRNA,GABAARγ2mRNA（lg2-△△Ct：1.20±0.27，0.76±0.38）表達(dá)明顯增強(qiáng)，與較耐藥對(duì)照組（lg2-△△Ct：-0.17±0.34，-0.15±0.26）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4，經(jīng)Western blotting法檢測(cè)，耐藥對(duì)照組GABAARα5,GABAARγ2的蛋

6、白含量（0.38±0.08，0.34±0.17）表達(dá)減少，與藥物敏感組（0.68±0.15，1.24±0.19）比較有明顯差異；經(jīng)過(guò)海馬刺激治療后，耐藥癲癇大鼠GABAARα5,GABAARγ2表達(dá)（0.82±0.07，1.98±0.45）明顯增加，與耐藥對(duì)照組（0.38±0.08，0.34±0.17）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：通過(guò)杏仁核電刺激慢點(diǎn)燃，并以苯妥英鈉和苯巴比妥鈉藥物篩選后可成功建立理想的耐藥