西瓜材料親緣關(guān)系及分類的RAPD分析.pdf_第1頁(yè)
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1、本文對(duì)西瓜材料親緣關(guān)系及分類進(jìn)行了RAPD分析。文章采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法,建立了西瓜RAPD分析的優(yōu)化反應(yīng)體系。所得最優(yōu)體系為:25μL的反應(yīng)體系中含有TaqBuffer25mmol/L,MgCL21.5mmol/L,dNTP250μmol/L,TaqEnzyme2.5U,Primer0.4μmol/L,DNA(10ng/μL)1μL;適宜的擴(kuò)增條件為94℃預(yù)變性5min,94℃變性30s,36℃復(fù)性30s,72℃延伸lmin,40個(gè)

2、循環(huán)后,在72℃保持7分鐘;從59個(gè)隨機(jī)引物中篩選出9個(gè)多態(tài)性好的隨機(jī)引物,用這9個(gè)引物對(duì)42個(gè)西瓜材料進(jìn)行擴(kuò)增,9個(gè)引物共擴(kuò)增出了92條DNA擴(kuò)增帶,平均每個(gè)引物10.2條,其中76條具有多態(tài)性,占總條帶數(shù)的82.6%,每個(gè)引物可擴(kuò)增出5-16條多態(tài)性帶,平均每個(gè)引物8.4條多態(tài)性帶;利用計(jì)算機(jī)軟件NTSYSpc(2.10版)統(tǒng)計(jì)RAPD數(shù)據(jù),用GeneticDistance計(jì)算材料間遺傳距離。得出42個(gè)西瓜材料的遺傳距離為0.065

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