巨噬細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)合轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β體外誘導(dǎo)髓源性抑制細(xì)胞的表型和功能研究.pdf

1、近年來(lái)發(fā)現(xiàn)髓源性抑制細(xì)胞(Myeloid derived suppressor cells，MDSCs)在固有免疫和適應(yīng)性免疫中發(fā)揮著重要的作用。作為免疫抑制細(xì)胞，MDSCs用于治療臨床器官移植和自身免疫疾病已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。許多研究表明，多種細(xì)胞因子可以調(diào)控MDSCs的分化和功能，MDSCs也可以有效減少器官移植排斥反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)病率。因此，體外建立一個(gè)從骨髓前體細(xì)胞或造血干細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生成熟和穩(wěn)定MDSCs的方法可為治療MD

2、SCs相關(guān)疾病和MDSCs的臨床應(yīng)用提供必要技術(shù)和理論基礎(chǔ)。
　　巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Macrophage-colony stimulating factor，M-CSF)作為調(diào)控因子，在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究表明，M-CSF在MDSCs的產(chǎn)生、募集、功能中發(fā)揮重要作用，而MDSCs本身也會(huì)自分泌M-CSF，形成反饋環(huán)路。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(Transforming growth factor bet

3、a，TGF-β)是炎癥反應(yīng)的一個(gè)強(qiáng)效調(diào)節(jié)因子，影響先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。已有報(bào)道指出腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的TGF-β可以參與調(diào)節(jié)不成熟髓系細(xì)胞（Immature myeloid cells，IMCs）的免疫抑制活性，并且MDSCs上膜結(jié)合TGF-β1對(duì)介導(dǎo)其免疫抑制功能同樣起非常重要的作用。
　　體外用M-CSF可誘導(dǎo)骨髓前體細(xì)胞分化為MDSCs，然而M-CSF誘導(dǎo)的MDSCs的穩(wěn)定性和免疫抑制活性還有待探討，并且M-CSF和TGF-β

4、聯(lián)合體外誘導(dǎo)髓源性抑制細(xì)胞的表型及功能研究也未見(jiàn)報(bào)道。因此，我們采用體外M-CSF、M-CSF聯(lián)合TGF-β誘導(dǎo)小鼠骨髓前體細(xì)胞產(chǎn)生潛在免疫抑制性細(xì)胞。結(jié)果顯示，流式細(xì)胞儀檢測(cè)到TGF-β增強(qiáng)了M-CSF誘導(dǎo)的MDSCs的免疫抑制活性，誘導(dǎo)產(chǎn)生的MDSCs能夠顯著抑制自體同源T細(xì)胞增殖和IFN-γ分泌;同時(shí)還檢測(cè)到M-CSF聯(lián)合TGF-β誘導(dǎo)的MDSCs明顯減弱了CD8+T細(xì)胞活化標(biāo)志CD69、CD25的表達(dá)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析顯示