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文檔簡介
1、中山大學博士學位論文組織工程技術修復兔顳下頜關節(jié)盤穿孔的實驗研究姓名:匡世軍申請學位級別:博士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學指導教師:張志光20060430中英文摘要過程中,種子細胞增殖分化,形成新的具有一定功能和形態(tài)的組織,達到修復缺損重建功能的目的。因此,組織工程技術有望成為治療關節(jié)盤穿孔或破碎的新方法,本研究試圖探討了用組織工程技術修復兔關節(jié)盤穿孔的可行性。由于組織工程技術需要大量的種子細胞和良好的細胞支架材料,本研究從種子細胞開始進行研究,
2、觀察聚乳酸(Poly—lacticAcid,PLA)的生物相容性,體外構(gòu)建了細胞PLA支架復合物,并觀察其在體內(nèi)對關節(jié)盤穿孔的修復作用。本實驗的研究內(nèi)容如下:第1部分兔骨髓問充質(zhì)干細胞和關節(jié)盤細胞的分離培養(yǎng)的實驗研究實驗1兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及其定向誘導分化的實驗研究目的:探索分離培養(yǎng)兔骨髓問充質(zhì)于細胞(MesenchymalStemCells,MSC)I構(gòu)方法,研究在特定培養(yǎng)液作用下MSC向軟骨細胞表形轉(zhuǎn)化,探討其作為組織工程
3、化軟骨的種子細胞的可行性。材料與方法:自兔脛骨上端處抽取4—6mL骨髓后用梯度離心法分離骨髓單個核細胞,進行原代和傳代培養(yǎng),測定不同代次MSC生長曲線,流式細胞儀測定細胞周期,透射電鏡下觀察MSC超微結(jié)構(gòu)。對第3代MSC以TGFB進行軟骨誘導分化對誘導后的細胞行甲苯胺藍、免疫組化染色,透射電鏡觀察誘導后細胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:原代培養(yǎng)的MSC24h后開始貼壁,大部分呈圓形、橢圓形,72h可見集落形成,4—5d可見集落形成,1014d融合8
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