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1、目的:鉛是一種常見(jiàn)的化學(xué)毒物,它廣泛的存在于人們的生活中,危害人體健康。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),妊娠期鉛接觸會(huì)嚴(yán)重影響孕婦和子代的健康,所以,降低鉛毒性的研究便受到了重視。硒是人體一種必需微量元素,是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的重要組分,對(duì)機(jī)體損傷具有一定的保護(hù)作用。隨著人們對(duì)硒認(rèn)識(shí)的加深,硒對(duì)鉛毒性的拮抗作用就成為了新的研究熱點(diǎn)。本文旨在探討不同劑量硒對(duì)染鉛孕鼠胎盤(pán)及仔代性別分化、生長(zhǎng)發(fā)育及青春期啟動(dòng)的影響,從而為孕期選擇最適宜的硒營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充量提供實(shí)驗(yàn)
2、依據(jù)。 方法: 1.40只健康的SD雌性大鼠于妊娠第一曰隨機(jī)分為5組,每組8只。中毒組(LT組)孕鼠自由飲用含2mg/ml醋酸鉛的雙蒸水,硒拮抗組(低劑量硒拮抗組-LA組,中劑量硒拮抗組-MA組,高劑量硒拮抗組-HA組、)孕鼠在此基礎(chǔ)上分別自由飲用含2,4,8μg/ml亞硒酸鈉的雙蒸水直至分娩,之后各組孕鼠哺乳并自由飲用雙蒸水直至產(chǎn)后21天。對(duì)照組孕鼠自妊娠第一日給予同體積的雙蒸水直至產(chǎn)后21天并哺乳。實(shí)驗(yàn)期間各組孕鼠均自由進(jìn)食
3、正常飼料。 2.孕20天時(shí),每只孕鼠測(cè)血鉛血硒水平及血清堿性磷酸酶活性,且每組隨機(jī)取4只孕鼠,處死后取胎盤(pán),免疫組化法測(cè)胎盤(pán)堿性磷酸酶含量,并且在光鏡和電鏡下觀(guān)察胎盤(pán)的超微結(jié)構(gòu)。 3.待各組剩余孕鼠自然分娩后,測(cè)每組仔鼠生后第一天體重及肛殖距離(AGD),根據(jù)肛殖距離區(qū)分性別,并觀(guān)察仔鼠生后第4天、第21天生存率。 4.在各組仔鼠出生后第21天,每組分別隨機(jī)選取雄性仔鼠及雌性仔鼠各6只,處死后稱(chēng)重,并分別測(cè)其睪丸
4、、附睪、子宮和卵巢的重量,余下幼鼠觀(guān)察包皮分離或陰道開(kāi)放的情況。 5.采用SPSS11.0軟件的卡方檢驗(yàn),Dunnett's檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果: 1.中毒組、低劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組堿性磷酸酶水平較對(duì)照組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,中劑量硒拮抗組堿性磷酸酶水平較對(duì)照組無(wú)明顯改變,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.中毒組和低劑量硒拮抗組血鉛水平較對(duì)照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組血
5、鉛水平較對(duì)照組無(wú)明顯差異。各組血硒水平無(wú)明顯差異。 3.與對(duì)照組相比,中毒組雌雄仔鼠出生體重明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其余各組與對(duì)照組相比較無(wú)明顯變化。 4.實(shí)驗(yàn)中未觀(guān)察到各組仔鼠性別比例之間的差異。 5.實(shí)驗(yàn)中未觀(guān)察到各組仔鼠出生時(shí)肛殖距離之間的差異。 6.與對(duì)照組相比,中毒組仔鼠生后第4天、第21天成活率明顯下降,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其余各組與對(duì)照組相比較無(wú)明顯變化,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 7.與
6、對(duì)照組相比,中毒組、低劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組仔鼠生后第21天體重明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中劑量硒拮抗組仔鼠生后第21天體重與對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異。 8.與對(duì)照組相比,中毒組、低劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組雄性仔鼠生后第21天睪丸和附睪的重量均明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中劑量硒拮抗組雄性仔鼠生后第21天睪丸和附睪的重量與對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異。 9.與對(duì)照組相比,中毒組雌性仔鼠生后第21天卵巢的重量明顯下降,差異有統(tǒng)
7、計(jì)學(xué)意義。其余各組雌性仔鼠生后第21天卵巢的重量與對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異。 10.各組間雌性仔鼠生后第21天子宮的重量無(wú)明顯差異。 11.與對(duì)照組相比,中毒組、低劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組雌鼠陰道開(kāi)放時(shí)間推遲3.2-5.2天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中劑量硒拮抗組雌鼠陰道開(kāi)放時(shí)間與對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異。 12.與對(duì)照組相比,中毒組、低劑量硒拮抗組和高劑量硒拮抗組雄鼠包皮分離時(shí)間推遲2.6-4.4天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
8、.中劑量硒拮抗組雄鼠包皮分離時(shí)間與對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異。 13.各組仔鼠陰道開(kāi)放、包皮分離時(shí)體重?zé)o明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異. 14.形態(tài)學(xué)觀(guān)察結(jié)果:光鏡下與對(duì)照組相比,中毒組和高劑量硒拮抗組胎盤(pán)細(xì)胞出現(xiàn)不同程度水腫、空泡變性和間質(zhì)水腫等現(xiàn)象:電鏡觀(guān)察,中毒組和高劑量硒拮抗組胎盤(pán)細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張和脫顆粒現(xiàn)象,線(xiàn)粒體嵴數(shù)量減少,部分嵴排列紊亂甚至融合消失。其中胎盤(pán)形態(tài)學(xué)改變最明顯的是中毒組和高劑量硒拮抗組,中劑量硒拮抗
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