CYP11A1在IFG-1保護心肌細胞線粒體機制中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　 氧化應激引起的心肌損傷在心臟疾病中起著至關重要的作用。胰島素樣生長因子1(IGF-1)可以促進多種細胞的存活。但其對心肌細胞氧化應激損傷的保護作用未明，也因此限制了IGF-1的臨床應用。心肌線粒體是氧化應激誘導的心肌細胞毒性的目標細胞器。本文研究了IGF-1在氧化應激誘導的大鼠心肌H9C2細胞凋亡中的一個新的線粒體機制。
　　 方法：
　　 實驗設置3個時間點(12h，24h，48h)IGF-1處理

2、組，和相應時間點對照組。用過氧化氫和無血清誘導大鼠心肌H9C2細胞凋亡，觀察IGF-1在抗氧化應激誘導的大鼠心肌H9C2細胞凋亡中的信號傳導途徑。大鼠心肌H9C2細胞凋亡以annexin V/PI雙染色法用流式細胞儀檢測。無血清誘導大鼠心肌H9C2細胞凋亡，加入IGF-1和/或LY294002處理，觀察大鼠心肌細胞中IGF-1對CYP11A1基因表達的調(diào)控。用RT-PCR法檢測CYP11A1基因RNA表達，用Western-blot法檢

3、測蛋白質(zhì)表達。用JC-1染色法檢測IGF-1對無血清誘導的大鼠心肌H9C2細胞線粒體膜電位(△Ψm)降低的改善情況。
　　 結果：
　　 用流式細胞儀觀察到無血清可以誘導大鼠心肌H9C2細胞凋亡，3h組細胞早期凋亡率最高。各時間點IGF-1單獨處理組大鼠心肌H9C2細胞CYP11A1基因的RNA和蛋白質(zhì)表達與相應時間點對照組相比下降，差異有統(tǒng)計學意義：RNA表達(F=388.32，P<0.01)，蛋白質(zhì)表達(F=77.7

4、5，P<0.01)；P13通道抑制劑LY294002單獨處理組的心肌細胞CYP11A1基因RNA表達下降，差異有統(tǒng)計學意義(F=198.24，P<0.01)。IGF-1與LY294002共同作用組CYP11A1基因的RNA和蛋白質(zhì)表達與無血清對照組相比下降，差異有統(tǒng)計學意義，RNA表達(F=198.24，P<0.01)，蛋白質(zhì)表達(F=189.26，P<0.01)。IGF-1可以減少無血清誘導的大鼠心肌H9C2細胞線粒體膜電位(△Ψm)

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