石菖蒲化學(xué)成分及神經(jīng)保護(hù)、抑菌活性部位的篩選研究.pdf

1、目的：對(duì)生品石菖蒲進(jìn)行系統(tǒng)分離，得到單體化合物；分析比較生品石菖蒲、傳統(tǒng)蜜炙品及按《回回藥方》炮制的蜜制品三者的化學(xué)成分的不同；對(duì)石菖蒲生品、兩種不同炮制品的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用與抑菌活性部位進(jìn)行初步篩選。
　　方法：采用75％乙醇微波提取生品石菖蒲，乙酸乙酯與正丁醇依次萃取提取物，回收溶劑，得到不同萃取部位，利用硅膠、Sephadex LH-20、HPLC與大孔樹脂等各種色譜技術(shù)進(jìn)行分離和純化，利用1D-NMR、2D-NMR等波譜技

2、術(shù)對(duì)單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析；另用75%乙醇超聲提取石菖蒲生品與兩種蜜制品，分別用乙酸乙酯、正丁醇對(duì)提取物進(jìn)行萃取，采用HPLC法對(duì)萃取物化學(xué)成分進(jìn)行比較分析；以去血清和魚藤酮兩個(gè)神經(jīng)細(xì)胞損傷模型篩選，比較其對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用；采用試管稀釋法，研究石菖蒲生品及不同蜜制品的乙酸乙酯和正丁醇萃取物對(duì)金黃色葡萄球菌、變形桿菌與綠膿桿菌3種供試菌的抑菌活性。
　　結(jié)果：
　　1.從生品石菖蒲中分離鑒定得到7個(gè)單體化合物（結(jié)構(gòu)見Fig

3、.1），分別為菖蒲烯二醇(1)，β-細(xì)辛醚(2)，鄰苯二甲酸二丁酯(3)，enone(4)，細(xì)辛醛(5)，β-谷甾醇(6)，α-細(xì)辛醚(7)。
　　2.兩種蜜制石菖蒲均與生品石菖蒲的化學(xué)成分存在顯著差異，蜜制品的小極性化學(xué)成分含量明顯低于生品。
　　3.與魚藤酮模型組比較，6個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率均略有降低，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與去血清模型組比較，乙酸乙酯層3個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率均顯著下降(P<0.01)；生品石菖蒲正丁醇萃取物和傳

4、統(tǒng)蜜炙品乙酸乙酯萃取物對(duì)金黃色葡萄球菌、變形桿菌和綠膿桿菌3種病原菌有較強(qiáng)抑制作用，其他萃取物作用較弱或沒有作用。
　　結(jié)論：
　　1.從乙酸乙酯層和正丁醇層系統(tǒng)分離并鑒定了7個(gè)單體化合物，包括1個(gè)倍半萜、2個(gè)甾體以及4個(gè)芳香類化合物，其中化合物1、4為首次從石菖蒲中分離得到。
　　2.《回回藥方》蜜煎菖蒲方中對(duì)石菖蒲的炮制處理方法，尤其是蜜制前的加工方法比較特殊，與傳統(tǒng)中藥炮制學(xué)上所講的蜜炙差異很大。通過HPLC分析

5、生品石菖蒲與兩種炮制品的化學(xué)成分，發(fā)現(xiàn)兩種蜜炙方法所得提取物存在明顯差異，為蜜制石菖蒲與生品石菖蒲的化學(xué)成分的進(jìn)一步研究提供參考依據(jù)。
　　3.初步考察了生品石菖蒲、回蜜制石菖蒲和傳統(tǒng)蜜炙石菖蒲的提取物在神經(jīng)保護(hù)方面的藥理活性差異。在去血清和魚藤酮兩種毒性所造成的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型中，3種提取物均未表現(xiàn)出顯著的改善作用。
　　4.生品石菖蒲正丁醇萃取物和傳統(tǒng)蜜炙品乙酸乙酯萃取物均有顯著的抑菌活性，而回蜜制各萃取物均無抑菌活性。