COX-2與大鼠重癥急性胰腺炎所致肝損傷的病理學研究.pdf

1、[背景]在急性胰腺炎(Acute pancreatitis，AP)中，約15％-20％的病人病情兇險，病程進展成為重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)，病人的癥狀及體征嚴重，并發(fā)癥多，病死率高，早期可伴有多器官功能的損害。肝臟是SAP時多器官功能受損最早的胰外器官，當發(fā)展至多器官功能衰竭(Mutiple organ failure，MOF)時，死亡率可高達50％。SAP所致多器官功能損害的發(fā)生機理

2、目前仍不十分清楚，是該病療效不理想，死亡率高的根本原因。SAP合并肝損害在臨床上比較常見且肝損害發(fā)生的早而迅速，肝臟在功能及病理形態(tài)學上有明顯的變化。SAP合并肝損害的機制并不十分清楚，研究表明主要與以下因素有關：胰腺釋放的破壞因子的作用；細胞因子及炎性介質的作用，其中TNF-α起著核心的作用；解剖學因素的影響。多種炎性介質及細胞因子參與了肝損傷的過程，其中前列腺素是一種重要的炎癥介質，在細胞因子網絡中發(fā)揮了重要的作用。在炎癥的候選始動

3、因子中，環(huán)氧合酶-2(COX-2)是炎癥中催化前列腺素合成的一種關鍵誘導酶，可致肝臟受損，引起一系列的病理形態(tài)學改變及肝細胞凋亡。肝臟受損時，激素、細胞因子、內毒素等誘導COX-2的表達，氧化應激與脂質過氧化的代謝產物也可誘導COX-2表達，參與肝損傷。目前對于COX-2在SAP肝損傷中對肝臟代謝的影響、在肝臟組織細胞形態(tài)學中的作用的研究已取得一定進展。而且，各種致病因素造成肝臟損害時，細胞因子、細菌內毒素及氧化應激與脂質過氧化的代謝產

4、物可誘導COX表達及PGs合成，參與肝臟的進一步損傷。進一步說明SAP所致肝損傷時的炎癥反應均與COX-2有密切的關系。雖然SAP并發(fā)MOF時，肝功能衰竭的發(fā)生率明顯少于肺功能衰竭及腎功能衰竭，但肝臟卻是SAP時功能受損最早的胰外器官。此外，由于其具有復雜的生理功能以維持機體內環(huán)境穩(wěn)定，肝臟在SAP病情發(fā)展中具有十分特殊的作用。目前發(fā)現(xiàn)COX-2在SAP發(fā)生時肝臟組織中呈高表達，并在肝臟損害中起重要的作用。因此，研究sAP并發(fā)肝臟損害的

5、機制及COX-2的作用，對于防治肝臟損害，進而防止MOF的發(fā)生具有重要意義。 [目的]通過建立大鼠SAP感染模型，觀察SAP肝損傷時的病理組織學變化和肝臟COX-2蛋白表達情況，探討COX-2在大鼠SAP肝損傷中的作用，以期對臨床SAP肝損傷的治療提供理論與實驗依據。 [方法]健康雄性wistar大鼠80只，隨機分2組：sham組(n=40)僅行胰膽管插管：NaTc組(n=40)行膽胰管逆行注射3.5％?；悄懰徕c，分別于

6、術后4、8、16、24小時處死動物。觀察動物全身情況及死亡率，胰腺濕／干比，血清淀粉酶、腹水淀粉酶及血清ALT、AST變化；肝臟、胰腺的大體及鏡下病理變化；應用免疫組化SABC法檢測各組大鼠肝組織中COX-2的表達。 [結果]①成功建立大鼠SAP模型：NaTc組動物死亡率顯著增高，肝臟、胰腺、損傷加重，胰腺濕／干比增加，血清淀粉酶、腹水淀粉酶及血清ALT、AST明顯升高；血清TNF-α含量升高。 ②肝臟病理組織學的改變：注射N

7、a-Tc后4h，肝組織有明顯炎性細胞浸潤，可見肝細胞發(fā)生氣球樣變性，肝細胞界限不清，肝細胞胞漿呈顆粒狀；術后8h匯管區(qū)內可見炎性細胞浸潤，小葉周邊的肝細胞發(fā)生嗜酸性變性，并可見凋亡小體；術后16h可見小葉中央發(fā)生部分片狀的出血壞死，周邊發(fā)生灶性壞死，部分肝細胞核消失，肝細胞結構不清，部分肝細胞核固縮，同時可見多處灶性出血壞死區(qū)，肝索變窄，雙核肝細胞增多，匯管區(qū)內炎性細胞明顯浸潤，并見匯管區(qū)內血管白細胞附壁，小靜脈內白色血栓形成；肝細胞發(fā)

8、生橋接壞死；術后24h可見小葉中央發(fā)生大片的出血壞死，肝細胞核濃縮，可見較多的凋亡小體，肝索變窄，肝竇擴張更加明顯，匯管區(qū)水腫，較多炎細胞浸潤，脈管擴張、充血。③電鏡觀察：對照組大鼠肝細胞形態(tài)結構正常，實驗大鼠胰膽管內注射Na-Tc4h大部分肝細胞形態(tài)結構正常，少數肝細胞可見線粒體擴張，個別細胞處于凋亡的最初階段，表現(xiàn)為染色質的邊集和胞漿濃縮；8h后可見部分血竇擴張，內皮細胞脫落，表面附著有聚集成堆腫脹變性的血小板，形成微血栓，16h后

9、在竇周隙內可見細胞碎片及凋亡小體；24小時后可見肝竇內巨噬細胞吞噬凋亡小體和細胞碎片，并可見核固縮。④肝組織中的COX-2表達：正常大鼠肝組織內COX-2蛋白呈低水平表達，造模后，大鼠肝組織內COX-2蛋白表達明顯增加，至24小時達最高水平：大鼠肝組織內COX-2蛋白表達與胰腺炎病變程度及肝損傷程度成正相關。 [結論]可通過使用?；悄懰徕c膽胰管逆行注射法建立大鼠SAP模型，SAP時大鼠的肝臟功能在病理生理學方面發(fā)生損傷性變化，肝