戊四氮誘導發(fā)育鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬Nogo-A的表達及意義.pdf

1、目的:研究神經(jīng)軸突再生抑制因子Nogo-A在發(fā)育期大鼠腦癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織內的表達水平變化,并觀察側腦室注射Nogo-A反義寡聚核苷酸對其表達變化的影響。為進一步完善癲癇性腦損傷的分子生物學機制提供依據(jù)。
　　 方法:腹腔注射戊四氮制作發(fā)育期SD大鼠(生后7天、14天、21天和28天四個日齡組)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)發(fā)作模型。將各日齡組隨機分為NS組、SE組,雌雄不限,選擇處理后6小時、1

2、2小時、1天、2天、3天、7天七個時間點,采用RT-PCR和Western blot方法分別檢測Nogo-AmRNA和Nogo-A蛋白在海馬組織的含量變化。干預實驗選擇生后21天SD大鼠,隨機分為反義寡聚核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)干預組(AS組)、隨機序列干預組(NAS組)及非干預組(NS組),每組6只,雌雄不限,各組均于操作后6小時制作SE發(fā)作模型,選擇處理后6h采用RT-PCR

3、檢測干預后Nogo-AmRNA及處理后1天Western blot檢測干預后Nogo.A蛋白在海馬組織的含量變化。
　　 結果:
　　 (1)各日齡組SE后6h Nogo-AmRNA含量較NS組明顯升高,P均＜0.05,14日齡組在SE后12h Nogo-AmRN,A含量較NS組也明顯升高,P＜0.05;而各日齡組SE后其余各時間點與NS組比較無統(tǒng)計學差異,P＞0.05;各日齡組SE后12h Nogo-A蛋白含量較NS組

4、明顯升高,P均＜0.05,7日齡SE后6h組及21日齡SE后1d組Nogo-A含量也較NS組明顯升高,P＜0.05,而各日齡組SE后其余各時間點與NS組之間無統(tǒng)計學差異,P＞0.05:Nogo-A mRNA提前于Nogo-A蛋白發(fā)生變化,但兩者變化趨勢一致。
　　 (2)在正常發(fā)育過程中,Nogo-AmRNA和Nogo-A蛋白在14日齡表達較其它日齡組明顯增高,P＜0.05。
　　 (3)Nogo-AmRNA表達在ASO