IFN-β基因修飾的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞抗前列腺癌細(xì)胞系PC-3效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察人類β干擾素(IFN-β)基因轉(zhuǎn)染的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)對(duì)前列腺癌細(xì)胞PC-3體外生長(zhǎng)情況的影響，初步探討人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為基因運(yùn)載細(xì)胞治療前列腺癌的可行性。 方法：構(gòu)建人類β干擾素基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pCDNA3.1-IFN—β，通過脂質(zhì)體介導(dǎo)，體外轉(zhuǎn)染人骨髓間充質(zhì)于細(xì)胞。將成功表達(dá)β干擾素的IFN—β—hMSCs與前列腺癌細(xì)胞系PC-3在Transwell培養(yǎng)體系中體外共培養(yǎng)，分別于共培養(yǎng)后第1天、第

2、3天、第5天對(duì)前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3進(jìn)行胎盼藍(lán)染色，計(jì)數(shù)存活細(xì)胞數(shù)目，流式細(xì)胞儀分析PC-3凋亡情況。同時(shí)保留部分細(xì)胞上清，ELISA法分析IFN-β的表達(dá)情況。 結(jié)果：經(jīng)IFN-β基因修飾的hMSCs在體外實(shí)驗(yàn)中能有效地抑制前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)其凋亡。共培養(yǎng)后第5天，IFN-β-hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組的存活PC-3數(shù)量由共培養(yǎng)前的0.5×106減少到(0.42±0.032)×106，而各對(duì)照組(PC-3單獨(dú)培養(yǎng)組、濃度

3、為1000IU/ml人工重組IFN-β作用下的PC-3單獨(dú)培養(yǎng)組、hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組、P—hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組)前列腺癌細(xì)胞數(shù)量均有不同程度的增長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組與各對(duì)照組之間比較差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。流式細(xì)胞儀分析前列腺癌細(xì)胞的凋亡率為40.29％。ELISA分析細(xì)胞上清：在轉(zhuǎn)染后4小時(shí)，IFN—β-hMSCs即可分泌表達(dá)出IFN-β，24小時(shí)到高峰(3～4×103IU/105個(gè)細(xì)胞)，72小時(shí)后表達(dá)量有所下