氧化低密度脂蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的研制.pdf_第1頁(yè)
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1、采用一次性密度梯度離心法從正常人血漿中分離得到的低密度脂蛋白(LowDensityLipoprotein，LDL)經(jīng)體外Cu2+氧化法制備的氧化LDL(OxidizedLDL，OxLDL)做為免疫原，通過(guò)雜交瘤技術(shù)構(gòu)建篩選了可穩(wěn)定表達(dá)特異性高親和力的抗OxLDL單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞。分別建立了適用于實(shí)驗(yàn)室規(guī)模以及生產(chǎn)規(guī)模的抗OxLDL單克隆抗體制備方法。并根據(jù)雙抗體夾心法原理，采用自行構(gòu)建的抗OxLDL單克隆抗體及酶標(biāo)記抗載脂蛋白B抗體

2、，建立了OxLDL酶聯(lián)免疫檢測(cè)法。方法學(xué)研究表明，該法重復(fù)性好，準(zhǔn)確性高，血漿中的其他脂蛋白及內(nèi)源性干擾物質(zhì)不干擾檢測(cè)反應(yīng)。根據(jù)該法組裝的OxLDL酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒與瑞士Mercodia公司同類產(chǎn)品的各項(xiàng)性能指標(biāo)均較接近。對(duì)該試劑盒臨床檢測(cè)性能的考核評(píng)價(jià)結(jié)果表明該試劑盒與瑞士Mercodia公司同類產(chǎn)品的臨床檢測(cè)性能基本一致，在該試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)下測(cè)定的血漿OxLDL含量正常值參考范圍為≤45.20U/ml，可疑值范圍為36.90U/m

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