膝關節(jié)內注射醫(yī)用臭氧對大鼠膝關節(jié)軟骨、滑膜組織的影響.pdf

1、醫(yī)用臭氧(Ozone，O3)又稱三氧原子，是氧分子(Oxygen，O2)的同素異形體，具有僅次于氟的強氧化性。常溫下半衰期約20min，易分解和溶于水。性質不穩(wěn)定，呈暫存狀態(tài)，在攜帶的氧原子除氧化后，組合為氧氣(O2)進入穩(wěn)定狀態(tài)。醫(yī)用臭氧臨床廣泛應用有近半個世紀歷史。早在第一次世界大戰(zhàn)中醫(yī)用臭氧用于治療因厭氧菌感染而受氣性壞疽折磨的德國士兵。近年來，隨著對醫(yī)用臭氧的生物藥學特性認識的深入研究，醫(yī)用臭氧逐漸擴展到感染性疾病、自身免疫性疾

2、病。安全性方面，在歐洲有2千萬余人次的醫(yī)用臭氧治療，醫(yī)用臭氧基本自血療法等規(guī)范的治療未出現嚴重不良事件，顯示出醫(yī)用臭氧是一種非常安全的治療技術。臨床上有學者將醫(yī)用臭氧膝關節(jié)腔內注射的方法治療膝退行性關節(jié)炎，取得了良好的效果，但其作用機制尚不清楚。本研究擬從生化改變和形態(tài)學方面觀察不同濃度醫(yī)用臭氧膝關節(jié)腔內注射對軟骨、滑膜組織的影響。探討醫(yī)用臭氧治療退行性關節(jié)炎的可能機制，為臨床工作提供理論依據和實驗依據。 第一部分：膝關節(jié)內注射

3、醫(yī)用臭氧對大鼠退行性關節(jié)炎的形態(tài)學研究 目的：觀察醫(yī)用臭氧膝關節(jié)腔內注射對大鼠退行性關節(jié)炎的影響，探討醫(yī)用臭氧對大鼠退行性關節(jié)炎的防治效應及可能機制。 方法：將SD大鼠40只隨機分為A(正常組)、B(模型組)、C(空氣組)、D(35μg/ml醫(yī)用臭氧組)、E(70μg/ml醫(yī)用臭氧組)五組，后四組復制出膝退行性關節(jié)炎(OA)模型，D、E組依據濃度不同，隔日1次給予膝關節(jié)腔內注射醫(yī)用臭氧，每次1ml，間隔一周再注射，共兩周

4、。4周后處死動物，HE染色觀察光鏡下關節(jié)軟骨的一般形態(tài)、Masson染色進行軟骨Mankin's評分，關節(jié)灌洗液超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)作為檢測指標。 結果：B組光鏡下關節(jié)軟骨退變明顯，Masson染色可見藍綠色丟失較重，SOD下降，MDA升高；D組顯微鏡下關節(jié)軟骨形態(tài)觀察有明顯改善，Mankin's評分較A組無顯著性差異，與B、C組比較有顯著性差異(P<0.05)，SOD升高，MDA下降。E組顯微鏡下及Man

5、kin's評分較B組無明顯改善，SOD下降，MDA升高。 結論：濃度為35μg/ml醫(yī)用臭氧能夠減輕退行性關節(jié)炎軟骨退變，增強機體清除自由基的能力，從而有效防治退行性關節(jié)炎。而濃度為70μg/ml醫(yī)用臭氧可引起組織細胞脂質過氧化反應，導致關節(jié)軟骨組織結構破壞。 第二部分：膝關節(jié)內注射醫(yī)用臭氧對大鼠正常膝關節(jié)軟骨、滑膜組織影響 目的：觀察不同濃度醫(yī)用臭氧對實驗大鼠膝關節(jié)軟骨組織的病理變化影響，以評估對正常軟骨、滑膜

6、組織的氧化應激程度。 方法：32只實驗大鼠隨機分為A、B、C、D四組。隨機選擇一側膝關節(jié)腔內注射醫(yī)用臭氧氣體。A組為濃度10μg/ml，B組為30μg/ml，C組濃度為50μg/ml，D組濃度為80μg/ml四組分別注射1ml氣體。注射醫(yī)用臭氧后2天、2周、4周后分別對膝關節(jié)軟骨、滑膜取活組織行病理學光鏡檢查，對側膝關節(jié)軟骨取活組織作空白對照組。 結果：與空白對照組比較，病理光鏡下顯示，關節(jié)內注射10μg/ml醫(yī)用臭氧2

7、天、2周、4周后軟骨、滑膜組織未見明顯異常。50μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧對軟骨、滑膜的氧化作用比30μg/ml的稍強，80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧氧化作用要強許多，軟骨在注射80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧后2周后出現不同程度的病理改變，并且4周后軟骨出現組織結構破壞。 結論：當濃度達到50μg/ml以上時，可能開始對軟骨、滑膜細胞產生損傷，80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧出現組織結構破壞。提示在臨床應用中30～50μg/ml的醫(yī)用臭氧