清熱解毒中藥對TNF-α誘導(dǎo)小鼠腎小球系膜細胞NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.pdf

1、目的：以清熱解毒藥金銀花、連翹、蒲公英、紫花地丁、板藍根、蚤休、半邊蓮、土茯苓、魚腥草、白花蛇舌草作為研究對象，重點觀察清熱解毒藥對TNF-α誘導(dǎo)的小鼠腎小球系膜細胞NF-κB信號通路的影響，探討清熱解毒藥治療腎病濕熱證的有效機理，為臨床應(yīng)用清熱解毒藥提供客觀依據(jù)。
　　 方法：通過MTT比色法檢測10味清熱解毒藥對小鼠腎小球系膜細胞SV40MES13生長的影響，從中選出對SV40MES13毒性適中、作用濃度范圍廣的3種清熱解毒

2、藥作為研究對象。以3種清熱解毒藥分別作用于TNF-α刺激的SV40MES13，MTT法檢測SV40MES13的增殖，ELISA法檢測SV40MES13細胞漿p-IκBα、細胞核和細胞漿NF-κBp65、培養(yǎng)上清液中MCP-1、IL-6的表達。
　　 結(jié)果：(1)終濃度10ng/ml的TNF-α能明顯促進SV40MES13的增殖(P＜0.05或P＜O.01)，而藥物處理組則能明顯抑制TNF-α刺激的SV40MES13的增值(P＜0

3、.01)，并且TNF-α與藥物聯(lián)合作用時抑制作用比單獨藥物處理更明顯，呈濃度依賴性。(2)ELISA結(jié)果顯示TNF-α刺激組細胞漿p-IκBα、細胞核NF-κBp65蛋白表達明顯增加(P＜0.01)，細胞漿p65表達明顯減低(P＜0.01)，出現(xiàn)明顯核轉(zhuǎn)位，細胞培養(yǎng)上清液中MCP-1、IL-6的含量明顯增加(P＜0.01)，提示TNF-α可以誘導(dǎo)SV40MES13的NF-κB活性，促進下游因子的分泌；不同藥物處理組細胞漿p-IκBα、細

4、胞核NF-KBp65蛋白表達明顯減低(P＜0.01)，細胞漿p65蛋白表達增加(P＜0.05或P＜0.01)，阻止NF-κB的核轉(zhuǎn)位，細胞培養(yǎng)上清液中MCP-1、IL-6的含量明顯降低(P＜0.01)，相同濃度的3種清熱解毒藥中以金銀花組作用更明顯，提示清熱解毒藥可以濃度依賴性地抑制SV40MES13的IKBα的磷酸化，減少細胞核NF-κBp65表達，阻止NF-κB核轉(zhuǎn)位，從而抑制NF-κB活性，減少下游因子的分泌。
　　 結(jié)論