抑制線粒體復合物Ⅳ對心肌缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：為探討抑制復合物Ⅳ在缺血再灌注損傷中的作用，采用CN-(氰根離子)選擇性抑制呼吸鏈復合物IV，觀察缺血再灌注后線粒體活性氧生成速率、呼吸鏈功能以及心磷脂含量變化。 方法：利用Langendorff離體心臟灌注模型，用含KCN(氰化鉀)的ST.Thomas停博液(KCN停跳液)以及含羥鈷胺的Kerbs-Henseleit液(VB12緩沖液)進行離體心臟常溫缺血再灌注實驗。56只大鼠隨機分為7組：平衡組(B)、續(xù)灌組(C)、對

2、照組(CON)、KCN停搏組(KCN)、缺血組(IS)、KCN停博液+VB12緩沖液再灌注組(KVB)和VB12緩沖液再灌注組(VB)。B組平衡灌注15min;C組用Kerbs-Henseleit液(K-H液)持續(xù)灌注85min；KCN組平衡灌注15 min后，KCN停跳液停搏并全心缺血40分鐘；IS組平衡灌注15 min后，ST.Thomas停跳液停搏并全心缺血40分鐘；KVB在KCN組的基礎上VB12緩沖液續(xù)灌30 min；CON在

3、IS組的基礎上K-H液續(xù)灌30min；VB組在IS組的基礎上VB12緩沖液再灌注30min。采用Powerlab離體灌注系統(tǒng)記錄心功能變化；CK，LDH評價心肌酶學變化；TTC染色法測定心肌梗死面積；Clark氧電極法測定線粒體呼吸功能；線粒體ROS生成速率和膜電位采用熒光探針法：線粒體心磷脂含量測定采用HPLC法。 結果：再灌注末，KVB組心肌酶升高程度較CON組更低，多數心功能指標更好，心肌梗死面積亦有所減少。缺血末無論采用

4、蘋果酸/谷氨酸為底物還是以琥珀酸為底物，KCN組ROS生成速率較IS組低。再灌注末，KVB組ROS生成速率均較CON組低，主要的呼吸功能指標要好；膜電位KVB組較CON組要高。心磷脂含量無論在缺血末還是再灌注末，采用KCN停博液均可減少心磷脂丟失。 結論：缺血期采用CN-抑制線粒體呼吸鏈，可減輕再灌注后心肌梗死面積；可更好的保存再灌注后線粒體呼吸功能、膜電位和心磷脂含量；對呼吸鏈復合物IV的抑制作用，可能是內源性氣體分子的信號感