量子點熒光探針在毛細管電泳熒光檢測中的應用初探及幾種生物活性物質(zhì)的檢測.pdf

1、毛細管電泳(CE)是上世紀80年代發(fā)展起來一項重要的分離分析技術，由于其具有低成本、低消耗、低污染、高靈敏度、高分辨率、高速度等優(yōu)點，符合生命科學、醫(yī)學、環(huán)境科學等領域越來越苛刻的分離分析要求，得到了迅猛的發(fā)展而成為目前強有力的分析技術之一。CE激光誘導熒光檢測法是目前最靈敏的檢測方法之一，然而由于激光器的成本高、體積大、可選擇的波長少等因素，制約了其發(fā)展和應用。隨著高亮度發(fā)光二極管(LED)的出現(xiàn)和發(fā)展，以LED作為熒光檢測裝置的激發(fā)

2、光源，可以大大減小體積和降低成本，為CE的發(fā)展和應用提供了更廣闊的前景。 量子點(QDs)是近年發(fā)展起來的一種新型熒光探針，與傳統(tǒng)的有機熒光染料相比，具有更優(yōu)良的光譜性能。其吸收光譜較寬，不同的量子點可以由同一波長的光激發(fā)，而不同的有機熒光染料分子，則常常需要采用不同波長的光來激發(fā)。量子點不易漂白，發(fā)射光譜與粒徑大小有關，通過調(diào)整其粒徑大小，可以發(fā)出不同顏色的熒光，從而使不同生物分子的標記、區(qū)分、識別變得更加容易，在生物化學、細

3、胞生物學、分子生物學等研究領域顯示了極其廣闊的應用前景，探索其在毛細管電泳分析中的應用，具有深遠的意義。 本文運用實驗室自組裝的CE光導纖維LED誘導熒光檢測裝置，建立了幾種生物活性物質(zhì)的分析方法，包括對免疫球蛋白IgG、腎上腺素（EP）和多巴胺（DA）的分離檢測，另外還探討了量子點熒光探針代替其它有機熒光染料，在毛細管電泳分析中的應用。其研究工作主要包括以下幾個部分： 1.合成了水溶性CdTe量子點，并采用共價偶聯(lián)法，

4、用CdTe量子點標記谷胱甘肽。在本實驗室自行設計、組裝的毛細管電泳光導纖維發(fā)光二極管誘導熒光檢測裝置上，以紫色LED作為激發(fā)光源，對量子點熒光探針及其標記的生物小分子（谷胱甘肽）進行分離，證實了量子點熒光探針在毛細管電泳應用的可行性。 2.建立了CE光導纖維LED誘導熒光檢測直接測定免疫球蛋白IgG的新方法。該方法以藍色的LED作為熒光檢測器的激發(fā)光源，熒光素異硫氰酸酯（FITC）作為柱前衍生試劑，采用毛細管區(qū)帶電泳，以pH9.

5、2的硼砂溶液為電泳緩沖液進行分離檢測。在優(yōu)化的實驗條件下，IgG的線性范圍是4.5×10-8～1.2×10-6g/L，檢測限為2.0×10-8g/L。將該方法應用于人血清中IgG含量的測定，不需要進行前期處理，具有簡單、高效、靈敏度高、經(jīng)濟選擇性好等特點。 3.應用CE光導纖維LED誘導熒光檢測裝置，建立了同時測定腎上腺素（EP）和多巴胺（DA）的方法。采用膠束電動色譜分離模式，通過優(yōu)化分離電壓、十二烷基硫酸鈉(SDS)濃度、背