姜黃素逆轉(zhuǎn)人肝癌耐藥細(xì)胞株BEL7402-5-FU多藥耐藥性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討姜黃素對(duì)人肝癌耐藥細(xì)胞株Bel7402/5-fu多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及可能的作用機(jī)制。
　　方法:采用氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-Fu)藥物濃度梯度遞增法誘導(dǎo)建立肝癌耐藥細(xì)胞株Bel7402/5-fu;MTT法檢測人肝癌細(xì)胞株Bel7402及其耐藥細(xì)胞株Bel7402/5-fu對(duì)5-Fu、阿霉素(ADM)、絲裂霉素(MMC)、甲氨蝶呤(MTX)、環(huán)磷酰胺(CTX)、順鉑(CDDP)等六種化療藥物的敏感性;We

2、sternblot法檢測Bel7402細(xì)胞、Bel7402/5-fu細(xì)胞及經(jīng)過0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml姜黃素作用后的Bel7402/5-fu細(xì)胞中多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)、肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)、程序化死亡因子5(PDCD5)蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.Bel7402/5-fu細(xì)胞對(duì)5-Fu、ADM、MMC、MTX、CTX、CDDP六種化療藥物表現(xiàn)出交叉耐藥性,

3、耐藥指數(shù)分別為109.55±14.30、23.49±6.19、19.19±2.91、2.52±0.30、13.32±4.01、1.85±0.29,其中對(duì)5-Fu耐藥指數(shù)最高。2.Westernblot條帶經(jīng)圖像分析測得Bel7402/5-fu細(xì)胞中的MRP1、LRP、P-gp蛋白表達(dá)高于Bel7402細(xì)胞(0.94±0.02/0.75±0.02/1.74±0.02Vs0.27±0.03/0.39±0.02/1.06±0.04,P<0.0

4、5),PDCD5蛋白表達(dá)低于Bel7402細(xì)胞(0.76±0.02Vs1.18±0.02,P<0.05)。3.Bel7402/5-fu細(xì)胞經(jīng)0、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml姜黃素作用后MRP1、LRP、P-gp蛋白表達(dá)逐漸降低(0.98±0.03/0.82±0.03/0.52±0.02/0.23±0.01、0.78±0.02/0.72±0.02/0.34±0.01/0.24±0.01、1.77±0.02/1.49±0.0

5、5/0.71±0.02/0.50±0.02,P<0.05),PDCD5蛋白表達(dá)逐漸增高(0.73±0.02/1.05±0.02/1.35±0.03/1.45±0.02,P<0.05)。
　　結(jié)論:與Bel7402細(xì)胞系相比,采用5-Fu濃度梯度遞增法誘導(dǎo)建立的肝癌耐藥細(xì)胞系Bel7402/5-fu對(duì)多種化療藥物表現(xiàn)出交叉耐藥性;姜黃素具有逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞多藥耐藥性的作用,可能與下調(diào)多藥耐藥相關(guān)蛋白MRP1、LRP、P-gp,上調(diào)凋亡相