編碼鼠CD20腺病毒載體感染的樹突狀細胞誘導抗小鼠淋巴瘤免疫.pdf_第1頁
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1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文編碼鼠CD20腺病毒載體感染的樹突狀細胞誘導抗小鼠淋巴瘤免疫姓名:王友臣申請學位級別:碩士專業(yè):腫瘤學指導教師:譚曉華20080501第三軍醫(yī)火學碩士學位論文mcD20/EGFP細胞作為靶細胞,免疫后小鼠脾細胞作為效應細胞,用3個效靶比(E:T)100:1、50:1和25:l,用乳酸脫氫酶釋放實驗檢測CTL殺傷率。3體內荷瘤實驗:取C57BL/6小鼠20只,4—6周(182)g,雌性,隨機分為兩組,實驗組(Ad5

2、/35mcD20感染Dcs免疫1次,10只),對照組(dl70一3感染DCs免疫1次,10只)。具體免疫方法同細胞毒實驗。免疫1周后,以生理鹽水調整B16F10mCD2研EGFP細胞濃度為2105個/200“1,按每只小鼠2105B16FlOmCD20/EGFP細胞小鼠右后腿上部背側皮下接種。接種后前14天隔日觀察,14天后每日觀察小鼠成瘤情況,此時尚未成瘤的小鼠繼續(xù)觀察至兩個月。結果1用G418篩選及流式細胞儀分選技術相結合的方法可獲

3、得穩(wěn)定表達mcD20的B16F10mCD20/EGFP腫瘤細胞株,流式細胞儀檢測991%的細胞表達EGFP,997%表達mCD20。2體外細胞毒性T淋巴細胞殺傷實驗:在效靶比為100:1、50:1和25:1情況下,實驗組的殺傷率分別為6383772%,(t=1533,PO01)、477053l%(t=1423,PO01)和2273311%(t=874,P001),對照組的殺傷率分別為1537O80%、1283284%和11101Ol%。

4、實驗結果有統計學意義。3荷瘤實驗:對照組小鼠在接種2105細胞的B16F10mCD20/EGFP細胞后16至18d內全部有腫瘤生長,實驗組僅于18d(1只)、20d(2只)、24d(1只)共有4只小鼠成瘤,且腫瘤體積小于對照組。實驗組其余小鼠繼續(xù)觀察至2個月,仍未見腫瘤生長。對照組成瘤率為lOO%,實驗組為40%,兩組間成瘤率有顯著性差異(x2=857,PO01)。提示Ad5/35mCD20能產生抗小鼠淋巴瘤的特異性免疫,對cD20的淋

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