牛早期卵母細胞和成熟前后的超微結構變化.pdf

1、本實驗用透射電子顯微鏡觀察體外成熟前后牛GV期卵母細胞的亞細胞結構，以及牛卵巢上不同發(fā)育時期卵母細胞過程中超微結構的變化，旨在為胚胎工程等相關研究提供依據(jù)。 選擇剛出生不久牛的卵巢和大量的性成熟前牛的卵巢作為研究對象進行電鏡觀察。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，卵原細胞具有一個大的圓形細胞核，初級卵母細胞前細線期和細線期，細胞核基質中出現(xiàn)電子致密的線狀結構，此時細胞核偏向于一側，初級卵母細胞雙線期出現(xiàn)了燈刷染色體。卵原細胞的細胞質中僅有少數(shù)的線

2、粒體，線粒體的密度中等，初級卵母細胞前細線期和細線期，發(fā)現(xiàn)在Mi之間存在顆粒狀或纖維狀物質，雙線期線粒體呈圓形，嵴很少，呈板狀，有的甚至不見嵴：有腔卵母細胞是線粒體數(shù)量增多，呈圓形或橢圓形，基質電子密度較高，并進一步向皮質區(qū)遷移；直徑2mm以上卵泡中卵母細胞的線粒體轉變?yōu)閹本€粒體。卵原細胞與濾泡細胞之間的距離很小，濾泡細胞的核呈多形性；初級卵母細胞與相伴的卵泡細胞間靠得很緊密，二者間僅有窄小的間隙；有腔的卵母細胞與濾泡細胞之間的距離變

3、大，濾泡細胞的核呈圓形。卵原細胞的細胞質中溶酶體含量較少；前細線期和細線期的初級卵母細胞溶酶體的數(shù)量增加，溶酶體和線粒體結構緊貼，卵丘細胞質中的溶酶體和線粒體密集分布；雙線期的初級卵母細胞有大量體積小、電子密度較高的溶酶體，這些溶酶體常常聯(lián)合在一起形成大的多泡體；有腔卵母細胞時，球狀的溶酶體變成線狀的溶酶體。卵原細胞的細胞質中囊泡數(shù)量較少，分布均勻；初級卵母細胞的前細線期和細線期數(shù)量顯著增加且偏向于細胞的一側；初級卵母細胞的雙線期有的囊

4、泡聚集在一起，大多有膜包圍，電子密度極低，囊泡中似乎沒有其他內容物；有腔卵母細胞時，有些囊泡中能看到一些絮狀物，囊泡數(shù)量明顯減少。以上關于牛初級卵母細胞不同時期超微結構變化的研究結果此前尚未見有相關報道。在牛的原始卵母細胞質中，未見有皮質顆粒；在初級卵母細胞前細線期和細線期皮質區(qū)出現(xiàn)比較少的明粒皮質顆粒；初級卵母細胞的雙線期皮質區(qū)顆粒密集；有腔卵母細胞皮質顆粒比較豐富，有四、五層，大部分位于皮質區(qū)，這時皮質顆粒為暗粒。此外，牛卵巢上有些

5、卵母細胞出現(xiàn)了細胞核皺縮、細胞器膨脹、自噬泡堆積，導致卵母細胞退化現(xiàn)象的發(fā)生；有些卵原細胞的細胞核與脂滴相伴存在；初級卵母細胞胞質中出現(xiàn)暈輪結構。 直徑為2～8mm卵母細胞體外培養(yǎng)24h后的卵母細胞，透明帶有增厚的趨勢；但體外成熟的卵母細胞要比體外未成熟的卵母細胞和體外成熟后去級體卵母細胞增加的厚度要小。體外培養(yǎng)24h后的成熟卵母細胞，表面微絨毛又細又長，都出現(xiàn)了倒伏現(xiàn)象；體外未成熟的卵母細胞微絨毛卻變得又短又粗，未見倒伏，體外

6、成熟后去級體卵母細胞微絨毛變得稀少。體外培養(yǎng)后的卵母細胞，脂肪滴的直徑有增大的趨勢；而體外培養(yǎng)成熟的卵母細胞，脂肪滴有兩種密度類型，并相伴存在，且其直徑大小略有增加；體外培養(yǎng)未成熟的卵母細胞，脂肪滴顯著變大，但密度不均一；體外培養(yǎng)成熟后又去極體的卵母細胞，與對照組比較，脂肪滴略有變大，但變化幅度不大，也有些脂肪滴的直徑表現(xiàn)下降的趨勢。三種處理的卵母細胞中，帽狀線粒體、異常線粒體的含量都有下降的趨勢；但體外成熟的卵母細胞中帽狀線粒體含量的