NPHP-8對(duì)線蟲(chóng)纖毛形態(tài)和功能的影響及INS-1細(xì)胞囊泡胞吐胞吞偶聯(lián)的研究.pdf

1、本文主要包括兩個(gè)方面的內(nèi)容：
　?。?）線蟲(chóng)nphp-8基因的研究
　　腎耗竭（Nephronophthisis）是一種在小孩和青年時(shí)期最常見(jiàn)的晚期腎功能衰竭遺傳性疾病。至今，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有10個(gè)與之相關(guān)的基因（NPHP1-9 and NPHP11）。NPHP8/RPGRIP1L是在Joubert syndrome(JBTS)和Meckel syndrome(MKS)中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的纖毛基因。但是，NPHP8的精確功能和它的突變

2、是怎樣引起人的這類(lèi)疾病都是未知的。本文，我們研究了線蟲(chóng)的nphp8同源基因并探討了它在感覺(jué)神經(jīng)元纖毛的功能。通過(guò)RACE分析，我們第一次確定了nphp-8的基因結(jié)構(gòu)，并發(fā)現(xiàn)了其啟動(dòng)子區(qū)存在明顯的X-box序列。另外，NPHP-8與NPHP-4在纖毛過(guò)渡區(qū)有相互作用，nphp-8基因缺失的線蟲(chóng)表現(xiàn)出不正常的染料吸收和趨化性的缺陷。本課題揭示了nphp-8/RPGRIP1L在纖毛的形態(tài)和纖毛介導(dǎo)的趨化性上的重要作用。
　?。?）胞吐偶

3、聯(lián)的胞吞研究
　　本課題主要是利用全內(nèi)反射熒光顯微鏡（TIRFM），通過(guò)轉(zhuǎn)染胞吐和胞吞相關(guān)的熒光標(biāo)簽，來(lái)研究囊泡分泌和籠形蛋白（clathrin）依賴(lài)的胞吞之間的時(shí)空關(guān)系。我們發(fā)現(xiàn)葡萄糖依賴(lài)的胞吞相關(guān)的籠形蛋白或者dynamin-1能在囊泡分泌之前或者之后聚集，并介導(dǎo)籠形蛋白依賴(lài)的快速或者慢速胞吞。通過(guò)囊泡回收的膜蛋白Syt7（Synaptotagmin7），我們也證實(shí)了籠形蛋白的聚集和消失確實(shí)與囊泡對(duì)它的內(nèi)容物回收相關(guān)。增強(qiáng)刺激