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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討針對(duì)大鼠RhoA基因的RNA干擾技術(shù)對(duì)HSC-T6 RhoA、Ⅰ型膠原(Collagen Ⅰ,ColⅠ)、Ⅲ型前膠原(Procollagen type Ⅲ,PCⅢ)、透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)及層粘連蛋白(Laminin,LN)的影響。
方法:將陰性質(zhì)粒(HK-A質(zhì)粒)及大鼠RhoA基因特異性siRNA表達(dá)質(zhì)粒(Rat1質(zhì)粒、Rat2質(zhì)粒)轉(zhuǎn)染至大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6。將細(xì)胞分組如下:A
2、組(正常培養(yǎng))、B組(轉(zhuǎn)染HK-A質(zhì)粒)、C組(轉(zhuǎn)染Rat1質(zhì)粒)、D組(轉(zhuǎn)染Rat2質(zhì)粒)。用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞RhoA、ColⅠ、PCⅢ mRNA的表達(dá)。用ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)上清中HA及LN的含量。
結(jié)果:Rat1質(zhì)粒所介導(dǎo)的RNAi技術(shù)能有效抑制大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6 RhoA、PCⅢ、ColⅠmRNA表達(dá)量及培養(yǎng)上清中HA及LN生成量。與A組相比,C組RhoA、PCⅢ mRNA表達(dá)量下降(p﹤0.05
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