YKL-40在門靜脈高壓脾臟中表達關系和臨床意義.pdf

1、背景：
　　脾腫大是門靜脈高壓綜合征及其他慢性肝臟疾病的并發(fā)癥之一，并潛在影響患者死亡率和降低患者生活質量[1]。在肝硬化的不同階段脾腫大的發(fā)生率在36-92％之間[2]。特別在我國，病毒性肝炎后肝硬化失代償是引起脾腫大的重要原因之一。脾腫大可以壓迫腹腔其他臟器并引起相應的臨床癥狀。巨脾有可能發(fā)生自發(fā)性破裂或因微小創(chuàng)傷而破裂[1]。而到目前為止，對脾腫大沒有特殊治療方法。YKL-40是“18-糖基水解酶”家族中的一員，到現在為止其

2、具體生物功能仍不甚清楚。有報道稱YKL-40可能參與細胞外基質重塑和基質降解[3]，先天性肺纖維化患者支氣管巨噬細胞有大量表達的YKL-40蛋白提示可能參與組織重塑和纖維化過程[4,5]。YKL-40也可以促進軟骨細胞和滑膜細胞的增殖[6]。眾多實驗表明YKL-40在人類疾病組織重塑過程中有重要作用，但YKL-40是否參與門靜脈高壓脾腫大組織重塑過程尚未得到證實。本實驗通過免疫組織化學技術、蛋白免疫印記技術及Masson三色纖維染色技術

3、檢測YKL-40和MMP-9及脾腫大纖維化程度，比較YKL-40與MMP-9、脾腫大纖維化程度及其他臨床資料的相關程度，進而探討YKL-40在門靜脈高壓脾臟組織重塑過程的作用及可能途徑。
　　目的：
　　研究YKL-40蛋白在門靜脈高壓脾臟中異常表達，分析其在門靜脈高壓脾臟纖維化重塑過程中的作用及與其他臨床參數的相關性。通過與MMP-9蛋白相關性研究找到YKL-40發(fā)生作用的可能通路，以期為門靜脈高壓脾臟腫大的臨床診斷、治療

4、等各方面提供新的理論支持和幫助。
　　方法：
　　1．采用免疫組織化學法，分別檢測人正常脾臟及門靜脈高壓患者脾臟中YKL-40蛋白和MMP-9蛋白表達情況，分析YKL-40蛋白表達與臨床資料參數之間及與MMP-9蛋白表達之間的相關性；
　　2．采用蛋白免疫印跡技術，分別檢測人正常脾臟及門靜脈高壓患者脾臟中YKL-40蛋白和MMP-9蛋白表達情況，結合免疫組織化學方法檢測的結果，定性和半定量的分析YKL-40蛋白表達與臨

5、床資料參數之間及與MMP-9蛋白表達之間的相關性；
　　3．采用Masson三色纖維染色技術，分析正常脾臟及門靜脈高壓患者脾臟纖維化程度，并比較YKL-40蛋白表達與脾臟纖維化程度的相關性。
　　結果：
　　1．免疫組織化學檢測結果示：YKL-40蛋白為細胞胞漿表達，主要分布于脾臟紅髓、邊緣區(qū)而不表達于淋巴小結，偶爾表達于增殖的血管平滑肌。門靜脈高壓患者脾臟YKL-40蛋白表達明顯高于正常脾臟，兩組YKL-40表達具有

6、顯著統(tǒng)計學差異（P<0.05），且其表達程度隨Child-Pugh分級增高而增高（P<0.05）。另外，YKL-40蛋白表達與患者自由門靜脈壓力呈正相關（R=0.499,P<0.01）；MMP-9蛋白主要定位于巨噬細胞或中性粒細胞胞漿中，主要分布于紅髓、邊緣區(qū)。MMP-9陽性細胞在門靜脈高壓患者脾臟和正常脾臟表達百分率分別為25.2％±0.90％和37.7％±1.27％，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P=0.000）。Spearman相

7、關性分析表明YKL-40蛋白表達與MMP-9表達呈負相關（R=-0.839,P<0.01）。
　　2．蛋白免疫印跡檢測結果示：門靜脈高壓患者脾臟YKL-40蛋白表達明顯高于正常脾臟，兩組YKL-40表達具有顯著統(tǒng)計學差異（P<0.05），且其表達程度隨Child-Pugh分級增高而增高（P<0.05）；MMP-9蛋白表達量在門靜脈高壓脾臟中較正常脾臟高，兩組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3．采用Masson三色纖

8、維染色技術，分析正常脾臟及門靜脈高壓患者脾臟纖維化程度。實驗結果顯示：門靜脈高壓脾臟中纖維增生較正常脾臟明顯增生，兩組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），Spearman相關性分析表明YKL-40蛋白表達與纖維化程度呈正相關（R=0.857,P<0.01）。
　　結論：
　　YKL-40在門靜脈高壓脾臟中較正常脾臟表達增高，且與FPP、Child-Pugh分級相關。YKL-40表達與脾臟纖維化程度成正相關，提示YKL-40可