美托洛爾降壓療效差異相關機制的臨床與基礎研究.pdf

1、目的：1.探討根據療效調整劑量后的高血壓病患者CYP2D6基因、β1腎上腺素能受體(β1-AR)基因多態(tài)性及獲得性因素對不同劑量美托洛爾降壓療效的影響。 2.探討基因型一致的自發(fā)性高血壓大鼠基線血壓、血漿腎素活性、血管緊張素Ⅱ水平、心肌β1-AR基因表達量及β1-AR基因DNA甲基化狀態(tài)等分子機制對美托洛爾降壓療效的影響。 方法：臨床試驗部分，對136例高血壓病患者進行美托洛爾干預，首先統(tǒng)一給予25mg/d，根據患者療效

2、及耐受情況調整藥物劑量至100mg/d、200mg/d，達到200mg/d的患者不再進行劑量調整。獲取相關獲得性因素指標并應用聚合酶鏈式反應-限制性片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)和聚合酶鏈式反應(PCR)方法檢測CYP2D6基因和β1-AR基因多態(tài)性。 動物實驗部分，將45只自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機分為美托洛爾(50mg/kg/d)干預組及生理鹽水對照組。每周監(jiān)測血壓水平并根據體重調整藥物劑量。四周后根據血壓下降水平將

3、美托洛爾組分為有效組及無效組。實驗完成后取SHR心肌組織及頸總動脈血。用基因測序方法驗證美托洛爾組SHR β1-AR基因型是否一致；用放免法檢測血漿腎素活性及血管緊張素Ⅱ水平；提取心肌組織RNA，采用熒光適時定量RT-PCR檢測β1-AR基因mRNA的表達；用MSP方法及亞硫酸鹽測序法檢測β1-AR基因DNA甲基化狀態(tài)。 結果：1.臨床試驗共有128例患者完成試驗，根據療效調整劑量后美托洛爾單藥治療總有效率為53.1％。單因素分

4、析表明，不同CYP2D6*10基因型(P＜0.05)、β1-AR基因389位基因型(P＜0.05)、BMI(P＜0.05)、基線舒張壓水平(P＜0.01)的患者口服美托洛爾降壓總有效率存在差異。亞組分析顯示，不同CYP2D6*10基因型(P＜0.01)、CYP2D6*2基因型(P＜0.05)、β1-AR基因389位基因型(P＜0.05)、基線舒張壓水平(P＜0.05)的患者口服25mg/d美托洛爾降壓有效率存在差異。不同CYP2D6*1

5、0基因型(P＜0.01)、基線舒張壓水平(P＜0.01)的患者口服100mg/d美托洛爾降壓有效率存在差異。不同CYP2D6*10基因型(P<0.05)、β1-AR基因389位基因型(P<0.01)、年齡(P<0.05)、BMI(P<0.01)的患者口服200mg/d美托洛爾降壓有效率不同。 2.多因素分析顯示：進入Logistic回歸方程的影響因素包括BMI、β1-AR389位基因型、基線舒張壓水平及劑量，預測根據療效調整劑量

6、后的美托洛爾降壓療效正確率為89.8％。 3.動物實驗共有36只SHR完成實驗，4周后美托洛爾組血壓為163.0±7.0mmHg，顯著低于生理鹽水組的190.8±8.5mmHg(P<0.01)。美托洛爾組SHR β1-AR基因型一致，單藥治療存在個體差異，有效率為57.7％。 4.有效組及無效組SHR基線血壓分別為187.2±6.3mmHg、177.5±9.4mmHg，兩者具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。兩組血漿腎素活性

7、及血管緊張素II水平無差異(P>0.05)。有效組心肌β1-AR基因mRNA表達量為21.2±50.5，高于無效組的8.2±13.2，且具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。生物信息學分析顯示人類及大鼠β1-AR基因均存在CpG島，但MSP及亞硫酸鹽測序結果表明美托洛爾組SHR β1-AR基因DNA均無甲基化修飾。 結論：1.不同高血壓病個體美托洛爾有效降壓劑量不同。影響療效的因素包括：CYP2D6*10基因型、β1-AR 389位基

8、因型、BMI及基線舒張壓水平。聯(lián)合遺傳因素、獲得性因素及劑量并不能完全解釋美托洛爾存在療效差異的原因。 2.25mg/d及100mg/d美托洛爾降壓療效的主要影響因素為CYP2D6、β1-AR基因型及基線舒張壓水平。年齡、BMI僅影響200mg/d美托洛爾療效。100mg/d美托洛爾治療無效的CYP2D6*1*1基因型，β1-ARArg389Arg基因型、BMI正常的老年患者可加量至200mg/d。 3.美托洛爾干預基因