羥基磷灰石表面改性后人工角膜鈦支架生物相容性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　將羥基磷灰石表面改性的三襻式人工角膜鈦支架植入角膜板層，觀察改性后支架材料的生物學(xué)反應(yīng)及組織愈合情況，評(píng)價(jià)其與角膜組織的生物相容性是否提高，探討作為人工角膜周邊材料的可能性。
　　方法：
　　設(shè)計(jì)并制備三襻式人工角膜鈦支架，經(jīng)酸堿法在表面沉積羥基磷灰石進(jìn)行表面改性；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇新西蘭白兔，并將24只新西蘭白兔隨機(jī)分為A、B、C三組，A組(9只)及B組(9只)分別于右眼角膜板層植入羥基磷灰石表面改性后的三襻式

2、人工角膜鈦支架(HA-Ti)及人工角膜鈦支架（Ti），C組（6只）為板層對(duì)照組，僅制備囊袋不植入支架，取C組左眼做正常對(duì)照；觀察人工角膜支架植入后組織反應(yīng)，重點(diǎn)觀察可能的并發(fā)癥及新生血管生長(zhǎng)情況，并分于術(shù)后2w、4w、16w取材，從組織病理學(xué)、苦味酸天狼猩紅染色、免疫組織化學(xué)及支架表面角膜組織超微結(jié)構(gòu)等方面綜合評(píng)價(jià)此方法改性后的人工角膜支架材料的生物相容性。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)觀察期間植入材料全部穩(wěn)定存留于角膜內(nèi)，未見

3、角膜溶解、支架移位、脫出等并發(fā)癥。HA-Ti組角膜新生血管化明顯。
　　2.組織病理學(xué)顯示術(shù)后2w，A組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)較B組和C組均明顯增多（P<0.05）；B組與C組之間未見明顯差異，4w和16w時(shí)A、B和C組各組間炎癥反應(yīng)無(wú)明顯差別；A組支架周圍基質(zhì)成纖維細(xì)胞增生顯著，術(shù)后2w、4wA組和B組成纖維細(xì)胞增生均較對(duì)照C組明顯增強(qiáng)（P<0.05），且A組增生明顯多于B組（P<0.05）；術(shù)后16w時(shí)各組間無(wú)顯著差異；苦味酸天狼猩紅染

4、色結(jié)果顯示，支架周圍組織中新生的III膠原(C-III)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒霫膠原(C-I)，組織愈合。
　　3．免疫組織化學(xué)染色顯示：正常角膜基質(zhì)中增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）無(wú)陽(yáng)性表達(dá)，術(shù)后A組各時(shí)間點(diǎn)角膜基質(zhì)中PCNA均可見陽(yáng)性表達(dá)，2w時(shí)為表達(dá)高峰，后逐漸減弱；2w、4w時(shí)PCNA表達(dá)強(qiáng)于C組（P<0.05），且較B組顯著升高（P<0.05）；16w時(shí)表達(dá)均減弱，且各組無(wú)顯著差異；基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2在正常角膜基質(zhì)中無(wú)明顯表達(dá)

5、，而在術(shù)后2w各組基質(zhì)中表達(dá)明顯增強(qiáng)，各時(shí)間點(diǎn)A組MMP-2表達(dá)均高于C組（P<0.05），且術(shù)后4w和16w時(shí)A組MMP-2表達(dá)均高于B組（P<0.05）
　　4．掃描電鏡下見與Ti支架比較，細(xì)胞外基質(zhì)在HA-Ti支架表面黏附逐漸增多且伸展良好，角膜基質(zhì)內(nèi)膠原纖維呈網(wǎng)狀交織，與支架結(jié)合更加緊密。結(jié)論：
　　經(jīng)酸堿法在鈦支架表面進(jìn)行羥基磷灰石表面改性后的人工角膜支架與Ti支架相比，明顯促進(jìn)了角膜血管化，有利于人工角膜的穩(wěn)定；