替勃龍對阿爾茨海默病模型大鼠的學習記憶能力及神經元凋亡的影響.pdf

1、目的:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年人常見的神經退行性疾病,其發(fā)病機制尚未明確。有文獻報道AD患者的血清雌激素降低,研究發(fā)現雌激素在AD的發(fā)生、發(fā)展及預后中起到十分重要的作用。大量的人群回顧性及前瞻性研究和體內外實驗表明,雌激素替代療法不僅對AD的治療有效,更重要的是能預防AD發(fā)病及推遲發(fā)病年齡。替勃龍(tibolone,7-甲基異炔諾酮)是一種甾體化合物,有弱的雌激素、弱的孕激素、非常弱的雄激素和顯

2、著的蛋白同化活性,在骨、大腦的體溫中樞和陰道表現為雌激素作用。本研究主要考察替勃龍對阿爾茨海默病模型大鼠的學習記憶能力及神經元凋亡的影響。
　　 方法:用立體定位技術對海馬CA1區(qū)微量注射Aβ25～35造成阿爾茨海默病模型;實驗大鼠隨機分為4組,假手術組(sham),AD組,大劑量替勃龍組(tibolone-L)[2.5 mg/(kg·d)];小劑量替勃龍組(tibolone-S)[0.25 mg/(kg·d)],每組10只。替

3、勃龍組于建模后24 h開始給藥,每天1次,連續(xù)7 d。AD組、假手術組腹腔注射等量的生理鹽水。各組術后均單籠飼養(yǎng)至大鼠完全清醒。Morris水迷宮檢測大鼠記憶水平;甲基百里香酚藍比色法測定Ca2+含量;硝酸還原法檢測一氧化氮合酶(NOS);TUNEL染色法檢測海馬細胞凋亡。實驗數據采用SPSS12.0統計軟件處理,單因素方差分析。
　　 結果:①行為學測定:在定位航行試驗中,模型組大鼠平均逃避潛伏期較對照組明顯延長(P＜0.01

4、),大劑量用藥組大鼠平均逃避潛伏期較模型組明顯縮短(P＜0.01),但仍比對照組長(P＜0.01);在空間探索試驗中,模型組大鼠跨越原平臺位置的次數較對照組明顯減少(P＜0.01),大劑量用藥組大鼠跨越原平臺位置的次數較模型組明顯增多(P＜0.05),但仍較對照組少(P＜0.01);小劑量用藥組與模型組比較,沒有顯著性差異。②對大鼠海馬Ca2+的影響:與假AD組相比AD組大鼠海馬Ca2+含量明顯增高(P＜0.01);與AD組比較,小劑量

5、用藥組大鼠海馬Ca2+含量減少(P＜0.05),大劑量用藥組顯著減少(P＜0.01)。③對大鼠海馬NOS的影響:與假AD組相比,NOS在AD組大鼠海馬的表達明顯增高(P＜0.01);與AD組比較,小劑量用藥組大鼠海馬的陽性細胞數減少(P＜0.05),大劑量用藥組顯著減少(P＜0.01)。④對照組大鼠海馬未見明顯神經元損傷,可見少量增生的神經膠質細胞,核小深染,呈圓形或卵圓形,胞質不著色;模型組大鼠海馬區(qū)注射點附近可見齒狀回背側顆粒細胞帶

6、斷裂,局部神經元大量缺失,細胞排列明顯紊亂,tunel細胞多,染色深,出現彌漫性膠質細胞反應,神經膠質細胞數(59.12±5.31)較假手術組(17.87±2.68)明顯增多(P＜0.01);大劑量用藥組神經元丟失程度減輕,神經膠質細胞數(46.63±4.47)較模型組明顯減少(P＜0.01);小劑量用藥組,有所改善,細胞排列較整齊,但是tunnel細胞數,與模型組比較無明顯意義。由此可見大劑量替勃龍可明顯提高Aβ25～35所致阿爾茨海

7、默病大鼠學習記憶水平;顯著降低海馬細胞凋亡率。
　　 結論:本實驗將Aβ注射入雙側海馬15 d后,大鼠學習記憶能力下降,海馬區(qū)可見彌漫性膠質細胞反應,局部神經元大量缺失,模擬了AD學習記憶障礙、炎癥反應、神經元受損等行為學和病理學特征。本研究表明替勃龍可明顯提高Aβ25～35所致癡呆大鼠學習記憶水平,能夠抑制AD大鼠海馬Ca2+含量的升高,能夠抑制NOS在AD大鼠海馬的表達,顯著降低海馬細胞凋亡率。提示替勃龍對阿爾茨海默病大鼠的