電針預(yù)處理對(duì)腦缺血-再灌注大鼠腦內(nèi)小窩蛋白-1以及血腦屏障通透性的影響.pdf

1、背景：腦缺血是嚴(yán)重威脅人類健康的高發(fā)疾病，其中血腦屏障是腦缺血-再灌注損傷重要的病理生理基礎(chǔ)。因此，研究腦缺血-再灌注損傷時(shí)血腦屏障的變化，以及可能的保護(hù)機(jī)制對(duì)腦缺血-再灌注損傷的治療具有重要的意義。電針作為祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的一種重要的治療手段，對(duì)于缺血缺氧性腦病以及缺血-再灌注損傷具有確切的治療效果，有關(guān)其作用機(jī)制方面的研究一直是研究熱點(diǎn)之一。
　　目的：通過(guò)復(fù)制腦缺血再灌注模型，探討電針預(yù)處理百會(huì)穴對(duì)于腦缺血-再灌注損傷大鼠血腦

2、屏障通透性以及Caveolin-1的影響。
　　方法：取SD大鼠140只，采用線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型。大鼠隨機(jī)分為四組:假手術(shù)組（S組），模型3h組（I/R3h組），模型24h組（I/R24h組），電針預(yù)處理3h組(EA+ I/R3h組)，電針預(yù)處理24h組(EA+I/R24h組)。首先，觀察電針預(yù)處理的腦保護(hù)作用，采用Longa評(píng)分對(duì)大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，采用Tunel法測(cè)細(xì)胞凋亡的情況，同時(shí)采用TTC染色觀察腦梗死容積

3、;其次，觀察電針預(yù)處理對(duì)血腦屏障通透性的影響，采用干濕重法評(píng)估腦組織含水量，采用透射電鏡觀察血腦屏障的超微結(jié)構(gòu);最后應(yīng)用western blot觀察電針預(yù)處理百會(huì)穴對(duì)緊密連接蛋白Claudin-5、Occludin，以及Caveolin-1、p-Caveolin-1、Akt、p-Akt、eNOS表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：(1)大鼠神經(jīng)功能評(píng)分，I/R3h組、I/R24h組分別為(2.30±0.22，2.45±0.22)，兩組之間沒有

4、顯著差異，但均明顯高于S組（0.00±0.00）。EA+I/R3h組、EA+I/R24h組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分分別為（2.00±0.13，2.10±0.16），兩組之間沒有顯著差異，但均明顯高于S組。EA+I/R3h組較I/R3h組，EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分有一定改善。
　　(2)TTC染色評(píng)估腦梗死的容積，與S組（0.00±0.00）比較，I/R3h組（42.87±4.70）、I/R24h組（43.75±

5、6.20）腦梗死容積顯著增加(P＜0.05)。電針預(yù)處理后能夠顯著地減少腦梗死的容積，EA+I/R3h組（24.40±4.54）較I/R3h組，EA+I/R24h組（25.63±2.76）較I/R24h組腦梗死容積顯著減少(P＜0.05)。
　　(3)大鼠腦組織Tunel染色，與S組（77.68±0.85）相比，I/R3h組（82.49±1.90）、I/R24h組（85.45±1.73）、EA+I/R3h組（80.24±0.53）

6、、EA+I/R24h組（83.00±0.20）大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)均顯著增加。I/R24h組較I/R3h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著增加，EA+I/R3h組較I/R3h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著減少。EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著減少。
　　(4)大鼠腦組織含水量，與S組(77.68±0.85)相比，I/R3h組(82.49±1.90)、I/R24h組（85.45±1.73）、EA+I/R3h組(80.

7、24±0.53)、EA+I/R24h組（83.00±0.20）大鼠腦組織含水量均顯著增加。I/R24h組較I/R3h組大鼠腦組織含水量顯著增加,EA+I/R3h組較I/R3h組大鼠腦組織含水量顯著減少。EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠腦組織含水量顯著減少。
　　(5)Claudin-5表達(dá)情況，與S組（0.49±0.03）相比，I/R3h組(0.11±0.13)、I/R24h組(0.08±0.10)、EA+I/R3h組（0

8、.38±0.05）、EA+I/R24h組(0.28±0.13)Claudin-5均顯著降低。EA+I/R3h組較I/R3h組，EA+I/R24h組較I/R24h組Claudin-5顯著降低。
　　(6)Occludin表達(dá)情況，與S組(0.55±0.03)相比，I/R3h組(0.27±0.05)、I/R24h組(0.06±0.02)、EA+I/R3h組(0.46±0.03)、EA+I/R24h組(0.44±0.06)Occludi

9、n均顯著降低。I/R24h組較I/R3h組，EA+I/R3h組較I/R3h組，EA+I/R24h組較I/R24h組Occludin顯著降低。
　　結(jié)論：1、電針預(yù)處理對(duì)于腦缺血-再灌注損傷具有保護(hù)作用。2、電針預(yù)處理顯著降低腦缺血-再灌注損傷時(shí)增高的血腦屏障的通透性。3、電針預(yù)處理顯著增加腦缺血-再灌注損傷時(shí)減少的Claudin-5、Occludin的表達(dá)。4、電針預(yù)處理顯著降低腦缺血-再灌注損傷時(shí)增加的腦微血管區(qū)內(nèi)皮細(xì)胞p-ca