SOCS3對肺腺癌細胞株生長和轉移的影響及相關信號通路的研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學博士學位論文SOCS3對肺腺癌細胞株生長和轉移的影響及相關信號通路的研究姓名：余祖濱申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（胸心外）指導教師：肖穎彬20080501第三軍醫(yī)大學博士學位論文5、Westernblot法檢測SOCS3對STAT3、Erkl／2、Akt信號分子活性的影響及細胞周期蛋f芻(cyclinDl、p21)的表達變化；半定量RTPCR和明膠酶譜分析檢測SOCS3對基質金屬蛋白酶(MMP2、9)表達和活性的影響。結果

2、：1、肺腺癌細胞株A549、SPC—A1在常規(guī)培養(yǎng)條件幾乎檢測不到SOCS3基因表達。2、轉染細胞經(jīng)G418篩選后獲得SOCS3穩(wěn)定表達肺腺癌細胞株；RTPCR和免疫熒光檢測證實SOCS3基因轉染組細胞中SOCS3mRNA和蛋白水平均有表達。3、SOCS3穩(wěn)定表達A549和SPC—A1細胞克隆形成抑制率分別為738％和559％。SOCS3穩(wěn)定表達A549細胞的倍增時間(64516h)較對照組(49209h)明顯延長(P001)。SPC—

3、A1細胞也取得了相似的結果(56915hvs44810h，P001)。4、化療藥物敏感性檢測發(fā)現(xiàn)，SOCS3可將A549細胞對順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高31、39、73倍；而SOCS3可將SPC—A1細胞對順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高34、34、64倍。5、與對照組相比，SOCS3穩(wěn)定表達A549和SPC—A1細胞移植瘤生長緩慢，瘤重顯著降低(O33_0089VS106_0139inA549；128_0319vJ296

4、_0699inSPC—A1；P001)；A549和SPC—A1移植瘤模型的抑瘤率分別為689％和568％。6、細胞粘附實驗結果顯示，SOCS3穩(wěn)定表達A549細胞在Matrigel及FN上粘附率(41222％和38846％)，較對照組(73581％和66865％)顯著降低(PO01)；SOCS3穩(wěn)定表達SPCA1細胞在Matrigel及FN上粘附率分別為(37235％和39642％)，較對照組(63946％和56453％)顯著降低(PO

5、01)。細胞遷移實驗結果顯示SOCS3穩(wěn)定表達細胞在培養(yǎng)18h穿膜細胞數(shù)為19321(A549)和23452(SPC—A1)，較對照組41735(A549)和47765(SPCA1)顯著減少(PO01)。細胞侵襲實驗結果顯示48h后SOCS3穩(wěn)定轉染細胞穿膜細胞數(shù)分別為12325(A549)和14744(SPC—A1)，均較對照組23O40(A549)(P005)和34554(SPCA1)(P001)顯著減少。7、在常規(guī)培養(yǎng)條件下，與對