電針調控Wnt信號通路促進腦缺血再灌注后神經(jīng)前體細胞的增殖.pdf

1、目的:
　　通過研究電針刺激腦缺血再灌注模型（MCAO大鼠），檢測腦組織中Wnt/β-catenin信號轉導通路相關分子的表達，以探討電針“曲池”“足三里”穴促進腦缺血后神經(jīng)前體細胞增殖的機制。
　　方法:
　　將81只雄性SD大鼠隨機分為假手術組(Sham)、模型組(MCAO)及電針組(EA)，以大腦中動脈閉塞(Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO)法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模

2、型。電針組大鼠于腦缺血再灌注24h后，開始電針患側“曲池”、“足三里”穴，疏密波，頻率1-20Hz，30min/次，1次/日，共3次，假手術組及模型組以同樣方法固定30min，但不進行電針刺激。采用Zea longa神經(jīng)行為學評分方法和Catwalk步態(tài)分析系統(tǒng)觀察大鼠肢體運動功能障礙的改變情況;TTC染色法顯示腦梗死體積的變化;免疫組織化學法觀察腦缺血大鼠神經(jīng)干細胞的增殖分化情況;應用逆轉錄PCR和蛋白免疫印跡法(Western Bl

3、ot)檢測腦組織中Wnt/β-catenin信號通路相關因子Wnt1、GSK3和β-catenin基因和蛋白的表達情況。
　　結果:
　　(1)腦缺血再灌注2h時（未經(jīng)電針干預），模型組和電針組大鼠的神經(jīng)行為學評分（P=0.724）和步態(tài)分析參數(shù)方面無明顯差異。而在腦缺血再灌注電針干預3d后，電針組的神經(jīng)缺損評分與模型組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.037）;同時，電針可以明顯地改善右前肢步幅(P=0.037);
　

4、　(2)TTC染色顯示電針組大鼠的腦梗死體積明顯小于模型組(電針組22.39±5.59％，模型組35.39±3.48％，P=0.002);
　　(3)電針刺激能夠促進腦缺血大鼠皮質半暗帶的神經(jīng)前體細胞(Nestin+/GFAP+)增殖，但對于海馬齒狀回的作用則不明顯(P=0.699);
　　(4)與假手術組比較，模型組大鼠Wnt1和β-catenin基因與蛋白的表達降低，GSK3表達升高，提示腦缺血損傷抑制了Wnt信號通路的