脊髓水平星形膠質(zhì)細胞GAT-1在大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎致神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf

1、目的:探討脊髓背角星形膠質(zhì)細胞GABA轉(zhuǎn)運體-1(γ-aminobutyric acid transporter-1.GAT-1)在大鼠坐骨神經(jīng)節(jié)扎致神經(jīng)病理性疼痛中的作用。 方法:第一部分，雄性SD大鼠隨機分為假手術組和坐骨神經(jīng)結(jié)扎組，在大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎損傷模型(chronic constriction injury,CCI)上，采用行為學、免疫熒光化學、共定位技術相結(jié)合的方法，檢測神經(jīng)病理性疼痛大鼠GAT-1、GFAP免疫陽

2、性細胞以及GAT-1與GFAP共定位在脊髓水平表達的變化；第二部分，CCI大鼠隨機分為前生理鹽水組、前NO-711組、后生理鹽水組、后NO-711組。利用鞘內(nèi)置管技術，應用Von Frey細絲機械刺激和熱輻射刺激大鼠足底的方法，觀察鞘內(nèi)注射GAT-1抑制劑N0.711對神經(jīng)病理性疼痛大鼠機械縮足反射閾值(mechanical withdrawal threshold,MWT)、熱縮足反射潛伏期(thermal withdrawal la

3、tency，TWL)和運動功能的影響，用免疫熒光化學及共定位技術觀察鞘內(nèi)注射NO-711對脊髓背角GFAP免疫陽性細胞表達以及GAT-1與GFAP共定位的影響。 結(jié)果:第一部分，坐骨神經(jīng)結(jié)扎后1～28天，結(jié)扎組大鼠同側(cè)后足機械縮足反射閾值和熱縮足反射潛伏期與基礎值及假手術組比較均降低(P<0.01)。神經(jīng)結(jié)扎后1天，大鼠脊髓GFAP免疫陽性細胞表達增多，并持續(xù)到術后28天(P<0.01)。與基礎值及假手術組比較，從術后1天至術后

4、14天，CCI組大鼠脊髓背角GAT-1表達增加(P<0.01)，并于術后21天恢復基礎值水平。對于GAT-1與GFAP共定位，與基礎值及假手術組比較，從術后1天至術后14天，CCI組大鼠脊髓背角GAT-1與GFAP共定位明顯增加。第二部分，術前鞘內(nèi)注射NO-711明顯延遲CCI大鼠熱痛敏和機械痛敏的形成，其延遲效應持續(xù)到術后7天。與術前生理鹽水組相比，術前NO-711組大鼠脊髓背角GFAP免疫陽性細胞表達明顯減少(P<0.01；P<0.

5、01)，在術后3、5天表現(xiàn)最為明顯；與術前生理鹽水組相比，從術后1天至術后7天，術前NO-711組大鼠脊髓背角GAT-1與GFAP共定位表達明顯增強。然而，術后鞘內(nèi)注射NO-711明顯抑制CCI大鼠已建立熱痛敏和機械痛敏，同時術后NO-711組大鼠脊髓背角GFAP免疫陽性細胞表達在給藥后的0.5h至4h明顯降低(P<0.01；P<0.01)；與ANS組相比，術后NO-711組大鼠脊髓背角GFAP與GAT-1共表達水平在在給藥后的0.5h