UGT1A1基因多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系.pdf

1、乳腺癌是女性最常見的、導(dǎo)致癌癥相關(guān)性死亡的主要惡性腫瘤之一。乳腺癌是一種激素相關(guān)性腫瘤，長期暴露于高水平的外源性及內(nèi)源性雌激素是乳腺癌發(fā)生發(fā)展的重要因素之一。雌激素與乳腺組織發(fā)育增殖相關(guān)，它可以與細(xì)胞內(nèi)受體結(jié)合，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子的活化，并促進(jìn)線粒體DNA的轉(zhuǎn)錄及環(huán)磷酸腺苷、腫瘤壞死因子、表皮生長因子的產(chǎn)生。雌激素的代謝產(chǎn)物也被證明具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用并能導(dǎo)致DNA損傷?；蚨鄳B(tài)性在雌激素的生成、代謝及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面起著重要作用。參與雌激素

2、的代謝基因的遺傳變異，可導(dǎo)致患乳腺癌的患病風(fēng)險增加。這個假說在包括細(xì)胞色素P450酶存在多態(tài)性檢測，兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶，谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶和N-乙酰轉(zhuǎn)移酶等不同酶代謝途徑方面都得到流行病學(xué)的驗(yàn)正。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGTs)是一種重要的Ⅱ相反應(yīng)酶，參與體內(nèi)葡萄糖醛酸化反應(yīng)過程。在包括類固醇激素在內(nèi)的內(nèi)源性物質(zhì)及致癌物質(zhì)的代謝過程中有著重要作用。試驗(yàn)證明尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1參與雌激素及其代謝產(chǎn)物兒茶酚胺的葡萄糖醛

3、酸化反應(yīng)。UGT1A1基因突變可導(dǎo)致雌激素代謝障礙，從而增加乳腺癌患病風(fēng)險。國內(nèi)外已有研究證明UGT1A1*28與乳腺癌的發(fā)病密切相關(guān)，但是UGT1A1*6與中國女性乳腺癌發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系還沒有文獻(xiàn)報道。
　　 目的:分析UGT1A1*28及UGT1A1*6與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險之間的關(guān)系，指導(dǎo)乳腺癌的早期診斷及預(yù)防。
　　 方祛:本研究共納入46名女性乳腺癌患者作為實(shí)驗(yàn)組，15名消化道腫瘤患者、13名健康女性作為對照組。所有研

4、究對象均為亞洲、漢族，且健康女性三代內(nèi)直系親屬無惡性腫瘤家族史。利用血液基因組DNA提取試劑盒，提取乳腺癌患者、消化道腫瘤患者及健康女性外周靜脈血DNA。根據(jù)UGT1A1目的基因序列，設(shè)計(jì)兩對特異性引物，以提取的DNA為模板，分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增UGT1A1基因的啟動子區(qū)（*28位點(diǎn)）和第一外顯子區(qū)域（*6位點(diǎn)）的序列。然后應(yīng)用DNA測序儀進(jìn)行測序，根據(jù)測序峰圖和序列，分析得出樣本基因型是野生型、雜合突變型或純合突變型。同時應(yīng)用免疫組織化

5、學(xué)染色方法，對乳腺癌患者病理組織石蠟切片進(jìn)行檢測，ER、PR、HER-2表達(dá)狀態(tài)。最后通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對乳腺癌患者與及健康女性進(jìn)行對比來分析UGT1A1基因多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1實(shí)驗(yàn)組與對照組UGT1A1*28與UGT1A1*6基因頻率分布:
　　 1.1乳腺癌患者整體UGT1A1*28基因頻率分布:89％(n=41)為野生型(*1/*1)，11％(n=5)為雜合突變型（*1/*28

6、），未發(fā)現(xiàn)純合突變型(*28/*28)。UGT1A1*6基因頻率分布:67％(n=31)為野生型(G/G)，26％(n=12)為雜合突變型(G/A)，7％(n=3)為純合突變型(A/A)。
　　 1.2消化道腫瘤患者UGT1A1*28基因頻率分布:87％(n=13)為野生型(*1/*1)，13％(n=2)為雜合突變型(*1/*28)，未發(fā)現(xiàn)純合突變型(*28/*28)。UGT1A1*6基因頻率分布:60％(n=9)為野生型(G/

7、G)，40％(n=6)為雜合突變型(G/A)，未發(fā)現(xiàn)純合突變型(A/A)。
　　 1.3正常女性UGT1A1*28基因頻率分布:61％(n=8)為野生型（*1/*1），39％(n=5)為雜合突變型(*1/*28)，未發(fā)現(xiàn)純合突變型(*28/*28)。UGT1A1*6基因頻率分布:100％(n=13)為野生型(G/G)，未發(fā)現(xiàn)雜合突變型(G/A)及純合突變型(A/A)。
　　 2乳腺癌患者與正常健康女性兩組間UGT1A1*

8、28與UGT1A1*6基因頻率分布比較:UGT1A1*28基因分布無明顯差異（x2=3.679，P=0.055）。UGT1A1*6基因概率明顯高于正常女性（x2=4.095，P=0.043）。
　　 3消化道腫瘤患者與正常女性兩組間UGT1A1*28與UGT1A1*6基因頻率分布比較:UGT1A1*28基因頻率分布無明顯差異（P=0.198）。UGT1A1*6基因概率明顯高于正常女性(P=0.018)。
　　 4消化道腫

9、瘤患者與乳腺癌患者相比UGT1A1*28及UGT1A1*6基因分布頻率均無明顯差別(P＞0.05)。
　　 5UGT1A1*6基因頻率分布與臨床相關(guān)因素間關(guān)系
　　 5.1乳腺癌患者ER、PR、HER-2不同表達(dá)狀態(tài)UGT1A1*6基因頻率分布無明顯不同（P＞0.05）。
　　 5.2乳腺癌患者是否絕經(jīng)UGT1A1*6基因頻率分布無明顯不同(P＞0.05)。
　　 5.3乳腺癌患者有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及原發(fā)腫瘤大