免疫細(xì)胞化學(xué)的方法在結(jié)腦早期診斷中的價(jià)值的研究.pdf

1、目的：結(jié)核性腦膜炎(tuberculosismeningitisTBM簡(jiǎn)稱“結(jié)腦”)是常見(jiàn)的由結(jié)核桿菌侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成的感染性疾病，如果沒(méi)有得到及時(shí)治療，可造成嚴(yán)重和致命的后果，致殘率和致死率很高。由于結(jié)腦是一種能治愈的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，在早期階段進(jìn)行特異性的治療是非常有效的，所以其預(yù)后的關(guān)鍵在于早期診斷、及時(shí)治療。作為微生物侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致的感染性疾病，找到病原體是診斷疾病的標(biāo)準(zhǔn)，所以結(jié)腦診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是腦脊液(cereb

2、rospinalfluidCSF)中發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌[1]。但結(jié)腦患者腦脊液的涂片抗酸染色陽(yáng)性率很低，約為10％，而結(jié)核菌培養(yǎng)所需時(shí)間較長(zhǎng)(1～2月)，且陽(yáng)性率僅20-30％[2]。我們臨床醫(yī)生亟待尋找一種快速、可靠的診斷結(jié)核性腦膜炎的方法以便可以早期診斷，及時(shí)治療。本研究對(duì)結(jié)腦組，對(duì)照組進(jìn)行腦脊液常規(guī)檢查和選用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法對(duì)腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)的結(jié)核桿菌抗原進(jìn)行檢測(cè)，以期找到一種簡(jiǎn)單、快速、確診結(jié)腦的新方法，并對(duì)結(jié)腦的發(fā)病機(jī)制有所探討。

3、 方法：實(shí)驗(yàn)組為35例結(jié)腦病人，均為臨床上診斷為結(jié)腦的住院病人，入選標(biāo)準(zhǔn)參考Ahuja[3]的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中女15例，男20例，年齡2～65歲，平均33±15.5歲。對(duì)照組病人35例，為其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者：參考人民衛(wèi)生出版社第四版神經(jīng)病學(xué)教科書(shū)[4]相應(yīng)診斷標(biāo)準(zhǔn)入選，男16例，女19例，年齡6～75歲，平均33.3±16.6歲。所有病例入院后24～48小時(shí)內(nèi)行腰穿，進(jìn)行腦脊液常規(guī)、生化、細(xì)胞學(xué)染色以及墨汁染色、阿利新蘭染色

4、檢查。留取兩張以上腦脊液離心細(xì)胞涂片進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。 結(jié)果1.腦脊液常規(guī)檢查結(jié)果：35例TBM患者的腦脊液生化顯示為：蛋白升高的34例(0.36～3.63g/l)，1例蛋白正常(0.18g/l)；糖濃度降低的35例(0.01～3.7mmol/1)：氯化物降低的34例(91.8～128.3mmol/1)，氯化物正常的1例(131.4mmol/l)。細(xì)胞數(shù)0～1050個(gè)/mm3。2.腦脊液細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)：結(jié)腦組腦脊液呈混合性細(xì)胞反

5、應(yīng)的28例，其中以淋巴細(xì)胞為主的混合細(xì)胞反應(yīng)14例，以嗜中性粒細(xì)胞為主的混合細(xì)胞反應(yīng)9例，單純混合型細(xì)胞反應(yīng)的5例，淋巴樣細(xì)胞學(xué)反應(yīng)3例。阿利新蘭和墨汁染色均陰性。對(duì)照組腦脊液中以淋巴樣細(xì)胞反應(yīng)為主有14例。5例化腦患者呈嗜中性粒細(xì)胞反應(yīng)。3例隱球菌腦膜炎患者CSF中可見(jiàn)隱球菌，阿利新蘭染色和墨汁染色均陽(yáng)性，腦囊蟲(chóng)患者顯示嗜酸性粒細(xì)胞增加。3.免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果：早期即可在腦脊液涂片上完整的單核樣細(xì)胞的胞漿內(nèi)檢測(cè)到結(jié)核桿菌的抗原，在我

6、們的免疫細(xì)胞學(xué)染色中顯現(xiàn)為棕紅色的微粒，且細(xì)胞核周圍染色較深，細(xì)胞核不被染色。80％左右的單核樣細(xì)胞有陽(yáng)性的顯色，且多次檢測(cè)可持續(xù)陽(yáng)性。在35例結(jié)腦患者中30例顯示陽(yáng)性，敏感性為85.7％，發(fā)病≤14天者17例陽(yáng)性，占94.44％，15～30天者10例陽(yáng)性，占83.33％，＞30天者3例陽(yáng)性，占60％。對(duì)照組無(wú)一例陽(yáng)性，特異性為100％。比較腦脊液細(xì)胞學(xué)與抗原檢測(cè)顯示，以嗜中性粒細(xì)胞為主的混合型細(xì)胞反應(yīng)11例，抗原檢測(cè)11例陽(yáng)性，以淋巴

7、細(xì)胞為主的混合型細(xì)胞反應(yīng)15例，抗原檢測(cè)14例陽(yáng)性，單純混合型細(xì)胞反應(yīng)6例，抗原檢測(cè)4例陽(yáng)性，淋巴樣細(xì)胞反應(yīng)3例，抗原檢測(cè)1例陽(yáng)性。35例病人中5例陰性，其中有4例單核細(xì)胞比例小于10％。 結(jié)論本研究選用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法對(duì)腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)的結(jié)核桿菌抗原進(jìn)行檢測(cè)及動(dòng)態(tài)觀察腦脊液細(xì)胞學(xué)的變化，證實(shí)以上檢查對(duì)結(jié)腦的診斷、鑒別診斷及病情轉(zhuǎn)歸判斷均有很高的實(shí)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)表明：免疫細(xì)胞化學(xué)方法和腦脊液細(xì)胞學(xué)對(duì)診斷結(jié)腦的敏感性較常規(guī)的抗酸桿