室內(nèi)裝修污染和MPO多態(tài)性與白血病關(guān)系的研究.pdf

1、白血病是我國(guó)十大高發(fā)性腫瘤之一，白血病死亡率約占成人惡性腫瘤死亡的10﹪。白血病病因及發(fā)病機(jī)理至今未完全清楚，目前認(rèn)為其發(fā)病是多種環(huán)境與遺傳因素相互作用的結(jié)果。本課題應(yīng)用流行病學(xué)調(diào)查與毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，旨在從環(huán)境．基因兩個(gè)層面，研究室內(nèi)裝修污染和MPO基因多態(tài)性與白血病發(fā)生的關(guān)系。 1 裝修居室空氣苯系物和甲醛污染的衛(wèi)生學(xué)研究對(duì)17戶(hù)新裝修居民住宅其客廳和主臥室空氣苯系物和甲醛濃度進(jìn)行長(zhǎng)期(裝修后第7、15、21、30日，第1.5

2、、2、2．5、3、4、5、6個(gè)月)的動(dòng)態(tài)跟蹤監(jiān)測(cè)；分析室內(nèi)裝修污染的特征與變化規(guī)律；以問(wèn)卷調(diào)查室內(nèi)裝修的基本情況，及其污染對(duì)人群健康的影響。檢測(cè)結(jié)果顯示苯系物濃度在裝修后兩個(gè)月呈快速下降趨勢(shì)，而降低到一定程度(0.2～0.3 mg/m<'3>)時(shí)，則降低趨勢(shì)緩慢。苯系物濃度變化與時(shí)間呈相關(guān)性。甲醛在裝修后4個(gè)月內(nèi)，降低程度不明顯：裝修后6個(gè)月甲醛濃度比起剛裝修完有顯著性降低。苯系物和甲醛濃度均為主臥室高于客廳。同時(shí)非實(shí)木家具居室甲醛濃度

3、明顯高于實(shí)木家具居室，但是苯系物濃度無(wú)明顯差異。各種不良反應(yīng)的出現(xiàn)與甲醛濃度有一定關(guān)系，甲醛濃度愈高，越有可能出現(xiàn)各種不良反應(yīng)。研究表明室內(nèi)裝修空氣污染普遍存在。主臥室污染較之于客廳嚴(yán)重；非實(shí)木家具居室污染較之于實(shí)木家具居室嚴(yán)重；居室甲醛濃度愈高，居民越有可能出現(xiàn)各種不良反應(yīng)。甲醛污染持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，污染較為嚴(yán)重，并且影響居住人群的健康。 2 苯和甲醛對(duì)BALB/C小鼠亞慢性毒性和遺傳毒性的研究以裝修主要污染物苯(50mg/kg

4、體重)和甲醛(2mg/kg體重)對(duì)BALB/C小鼠進(jìn)行聯(lián)合多次(1次/d，30d)低劑量腹腔注射染毒，觀察其對(duì)小鼠的生物學(xué)作用特點(diǎn)，以及停止染毒后的蓄積作用，探討長(zhǎng)期低劑量接觸苯和甲醛可能導(dǎo)致的亞慢性毒性、遺傳毒性：主要檢測(cè)指標(biāo)有：一般隋況、血常規(guī)指標(biāo)、染色體損傷、DNA損傷、臟體比值、肝MPO酶活性、器官病理檢查、骨髓像鏡檢。結(jié)果顯示染毒后，實(shí)驗(yàn)組小鼠體重明顯低于對(duì)照組。血液學(xué)指基金項(xiàng)目：江蘇省醫(yī)學(xué)科研基金(H200538)；江蘇省研

5、究生培養(yǎng)創(chuàng)新工程基金(蘇教研2005-7)；東南大標(biāo)結(jié)果可見(jiàn)：染毒后，苯導(dǎo)致小鼠白細(xì)胞數(shù)和血小板數(shù)增高，紅細(xì)胞數(shù)降低；甲醛導(dǎo)致小鼠白細(xì)胞數(shù)顯著降低;苯-甲醛組紅細(xì)胞數(shù)顯著降低，血小板數(shù)量增加;表明對(duì)造血系統(tǒng)已經(jīng)有一定損傷。染毒結(jié)束后，大部分小鼠血液學(xué)指標(biāo)即趨于正常；而部分小鼠白細(xì)胞數(shù)和中性粒細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于或高于正常值，表現(xiàn)為血象異常，表明造血系統(tǒng)已經(jīng)受到損害。微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示甲醛組微核率最低，苯-甲醛組染色體損傷最為嚴(yán)重，提示苯和甲醛可

6、能具有協(xié)同作用。染毒結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)組小鼠微核率雖略有降低，但仍高于對(duì)照組。彗星實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，染毒15d DNA損傷較輕；隨著染毒時(shí)間的增加，DNA損傷加重，各項(xiàng)指標(biāo)均具有顯著性差異，以苯-甲醛聯(lián)合染毒組損傷最為嚴(yán)重，苯和甲醛之間協(xié)同作用增大：甲醛組損傷最輕。染毒結(jié)束后觀察，各實(shí)驗(yàn)組DNA損傷略有降低，但是仍然高于對(duì)照組。苯和甲醛組小鼠肝臟MPO酶活性低于對(duì)照組；苯．甲醛組MPO酶活性與對(duì)照組相比，無(wú)明顯差異；部分小鼠的MPO酶活性明顯高于

7、對(duì)照組；腎體比值、脾體比值和胰體比值與對(duì)照組相比有顯著性差異。器官病理檢查未發(fā)現(xiàn)異常，骨髓像鏡檢不支持白血病診斷。綜合分析，發(fā)現(xiàn)苯．甲醛組和甲醛組共有6只小鼠具有與白血病確診指標(biāo)相似的陽(yáng)性癥狀。研究表明同時(shí)暴露于低劑量的苯和甲醛，可誘導(dǎo)小鼠DNA和染色體損傷；對(duì)肝、腎、脾、胰腺、胸腺的功能有一定影響，導(dǎo)致外周血象和肝臟MPO酶活性的改變；且可導(dǎo)致骨髓增生活躍。苯和甲醛的聯(lián)合毒性有一定的協(xié)同作用。苯-甲醛組和甲醛組部分小鼠具有白血病發(fā)病趨

8、勢(shì)，尚需進(jìn)一步研究。 3 ALM-ASP法篩檢MPO基因白血病易感性相關(guān)SNPs的研究應(yīng)用病例-對(duì)照流行病學(xué)方法，對(duì)中國(guó)漢族人群的原發(fā)性成人急性白血病病例(135例)和對(duì)照(187例)提取基因組DNA，應(yīng)用ALM-ASP技術(shù)，檢測(cè)分析MPO基因啟動(dòng)子與外顯子區(qū)域9個(gè)位點(diǎn)的SNPs。以PCR產(chǎn)物測(cè)序和PCR-RFLP法驗(yàn)證ALM-ASP法，三者分析結(jié)果一致性較高。中國(guó)漢族人群中，MPO-1816，-586,-468,53位點(diǎn)突變

9、型等位基因的頻率分別為17.11﹪，17.1 1﹪，22.99﹪，5.08﹪：MPO-1468,-1053,90,93，115位點(diǎn)，在病例與對(duì)照組中均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)突變基因型。x<'2>檢驗(yàn)分析表明MPO-468位點(diǎn)SNPs與急性白血病的發(fā)生相關(guān)(x<'2>=3.8749，P=0.049)，MPO -468突變基因型與急性白血病發(fā)生有一定關(guān)系(x<'2>=5.1478，P=0.0233)。MPO-1816和-586位點(diǎn)之間呈完全連鎖不平衡；-

10、1816，-586和-468 3個(gè)位點(diǎn)之間形成連鎖不平衡區(qū)域；其中-1816C/-586C/-468G,-1816T/-586T/-468A，-1816T/-586T/-468G3種單倍型的頻率大于0.03，占所有單倍型的98.6﹪；該3種單倍型在中國(guó)漢族人群中分布頻率分別為15.1﹪，7.4﹪，76.1﹪。結(jié)果表明MPO -1816，-586，-468連鎖不平衡區(qū)域可能與急性白血病的發(fā)生無(wú)關(guān)。應(yīng)用多因素非條件Logistic回歸模型分

11、析基因．基因的交互作用，發(fā)現(xiàn)MPO -1816與-468，-586與-468位點(diǎn)之間具有交互作用，均表現(xiàn)為協(xié)同作用。研究表明ALM-ASP技術(shù)精確性較好，準(zhǔn)確性較高，適于高通量的多位點(diǎn)SNPs檢測(cè)。MPO-468位點(diǎn)SNPs與急性白血病的發(fā)生有一定的關(guān)系。MPO-468位點(diǎn)突變基因型可能是急性白血病發(fā)生的保護(hù)因素。MPO-1816，-586，-468位點(diǎn)連鎖不平衡區(qū)域可能與急性白血病的發(fā)生無(wú)關(guān)。MPO基因單倍型與急性白血病發(fā)生的關(guān)系有待

12、進(jìn)一步探討。同時(shí)攜帶-1816、-586、-468野生基因型患急性白血病的危險(xiǎn)性增加。 4 環(huán)境和基因交互作用與急性白血病發(fā)生關(guān)系的研究應(yīng)用1∶1配對(duì)病例．對(duì)照的流行病學(xué)調(diào)查方法，采用單因素與多因素條件Logistic回歸模型分析，篩檢成人急性白血病(病例、對(duì)照各220例)的環(huán)境危險(xiǎn)因素，計(jì)算各因素調(diào)整人群歸因危險(xiǎn)度與綜合歸因危險(xiǎn)度。篩檢出裝修后入住間隔時(shí)間(OR=1.526)、職業(yè)接觸有毒有害物質(zhì)時(shí)間(OR=1.588)、吸

13、煙時(shí)間(OR=1.307)3項(xiàng)因素為急性白血病的環(huán)境危險(xiǎn)因素，其調(diào)整人群歸因危險(xiǎn)度分別為23.68﹪、20.4﹪、12.31﹪，綜合歸因危險(xiǎn)度為48.46﹪。應(yīng)用多因素非條件Logistic回歸模型分析環(huán)境．基因的交互作用，得出裝修后入住間隔時(shí)間與職業(yè)接觸有毒有害物質(zhì)時(shí)間同MPO-468位點(diǎn)野生基因型分別在急性白血病發(fā)生中存在協(xié)同作用。職業(yè)接觸有毒有害物質(zhì)時(shí)間和MPO-1816，-586,-468野生基因型在急性白血病發(fā)生中存在協(xié)同作用