MAPK抑制劑U0126對(duì)高糖環(huán)境中腎小球系膜細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的： 探討高糖環(huán)境中腎小球系膜細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)的變化，以及高糖環(huán)境刺激腎小球系膜細(xì)胞可能的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。進(jìn)一步研究MAPK抑制劑UO126對(duì)高糖環(huán)境中腎小球系膜細(xì)胞的保護(hù)作用。 方法： 1、將培養(yǎng)的腎小球系膜細(xì)胞分為六組：正常糖環(huán)境組、高糖環(huán)境組、高糖+UO126 2.5umol幾組、高糖+UO126 5umol/L組、高糖+UO126 10umol/L組、正常糖+UO126 10umol/L。 2、

2、分別在培養(yǎng)24和48小時(shí)后，用RT-PCR和Western blot方法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白(FN)和細(xì)胞外基質(zhì)重要相關(guān)因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β 1)的mRNA表達(dá)的變化，以及p-ERK1/2(磷酸化的ERK1/2)、總ERK1/2蛋白的表達(dá)。用p-ERK1/2與總ERK1/2蛋白比值反映ERK通路的激活情況，觀察U0126對(duì)幾種不同情況下ERK通路阻斷的狀況。 結(jié)果： 1、腎小球系膜細(xì)胞在高糖環(huán)境的刺激下，F(xiàn)

3、N和TGF-β mRNA表達(dá)的明顯升高，刺激時(shí)間越長(zhǎng)升高越明顯： 2、高糖環(huán)境中的腎小球系膜細(xì)胞經(jīng)UO126干預(yù)后，F(xiàn)N和TGF-β mRNA表達(dá)的明顯下降，表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系； 3、腎小球系膜細(xì)胞在高糖環(huán)境的刺激下，總ERK1/2蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化，但p-ERK1/2與總ERK1/2比值較正常對(duì)照組明顯增加； 4、高糖環(huán)境中的腎小球系膜細(xì)胞經(jīng)U0126干預(yù)后p-ERK1/2與總ERK1/2比值明顯下降，且呈濃