芪參益氣方抗急性心肌缺血作用的蛋白質組學研究.pdf

1、蛋白質組學的誕生與發(fā)展，為研究蛋白質表達和功能變化提供了強有力的技術支持，使人們可以從系統(tǒng)的角度了解藥物在蛋白質水平上對機體的作用。中藥具有多組分、多靶點、整合調節(jié)的作用特點，運用蛋白質組學技術發(fā)現中藥活性物質可能的作用靶點，了解中藥作用途徑，將有助于在分子層次上詮釋傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的現代生物學意義。本文以急性心肌缺血大鼠的心肌蛋白質組為研究對象，首先通過實驗研究建立和優(yōu)化心肌蛋白質組的雙向電泳分析方法；然后利用該方法對芪參益氣方的抗急性

2、心肌缺血作用機制進行研究，主要研究內容如下： 1.大鼠心肌蛋白質組分析方法研究：從大鼠急性心肌缺血模型中獲取缺血區(qū)心肌組織，研究建立蛋白提取、純化等方法。通過對心肌蛋白質組分析過程中各關鍵參數的優(yōu)化(包括上樣量，IPG膠條規(guī)格，等電聚焦條件和SDS-PAGE電壓等條件)，建立了心肌蛋白質組學雙向電泳分析方法。運用該方法對維拉帕米作用下急性心梗大鼠的心肌蛋白組進行分析，結果表明該法能較理想地分離出差異蛋白，并獲取了15個差異蛋白進

3、行質譜鑒定。 2.芪參益氣方抗急性心肌缺血作用的蛋白質組學研究：對中藥方劑芪參益氣方抗心肌缺血作用開展藥效學實驗，并利用已建立的方法對芪參益氣方給藥3天與7天的心肌缺血大鼠心肌蛋白質組進行分析，研究發(fā)現35個蛋白差異點。對這些差異表達的蛋白進行質譜鑒定后發(fā)現其與能量代謝、抗氧化應激等作用有關。研究結果表明，芪參益氣方的心肌保護作用與恢復心肌損傷過程中的能量供應、對抗氧化應激等作用有關。 通過以上研究，本論文成功建立了心肌