人肺癌細胞的STAT3信號傳導途徑的研究.pdf

1、目的: 以人肺腺癌A549細胞株，A549/CARP耐藥株為研究對象，采用免疫組化法和免疫印跡法（Western Blotting）分別測定A549及A549/CARP中信號傳導和轉錄活化蛋白3（STAT3）、肺耐藥蛋白（LRP）、多藥耐藥蛋白（MRP）的蛋白表達情況，探明STAT3與肺癌細胞增殖分化、抗凋亡作用與耐藥之間的關系。方法: 以不同濃度卡鉑誘導A549產生細胞耐藥株,MTT法檢驗其細胞耐藥性，采用免疫組化實驗檢測A549和A

2、549/CARP細胞中STAT3、LRP、MRP表達情況；分別提取A549、A549/CARP細胞胞漿蛋白和核蛋白，通過SDS-PAGE和Western Blotting試驗鑒定STAT3、LRP、MRP的表達蛋白。結果: 成功誘導了A549/CARP耐藥細胞株。免疫組化結果示①A549組、A549/CARP組STAT3陽性細胞數分別為146.53±23.41和166.73 ±43.06（P>0.05），二者無顯著性差異；②A549組、

3、A549/CARP組LRP陽性細胞數分別為119.93±42.10和172.67±44.89（P<0.01），二者有顯著性差異；③A549組、A549/CARP組MRP陽性細胞數分別為112.40±35.07和151.73±33.92（P<0.01），二者有顯著性差異；④STAT3與LRP無相關性（r=-0.321,P>0.05）、STAT3與MRP無相關性（r=-0.254,P>0.05）；⑤LRP與MRP表達間無相關關系（r=0.0

4、61,P>0.05）。Western Blotting實驗證實在A549組、A549/CARP組胞漿內有STAT3的表達，二者無顯著性差異，未檢測到LRP、MRP的表達。結論：①A549/CARP耐藥株的建立可作為尋找和篩選抗耐藥腫瘤藥物的模型；②STAT3在A549與A549/CARP兩組中表達均增加，提示STAT3參與了NSCLC的增殖分化和抗凋亡作用；同時A549與A549/CARP的表達無顯著性差異則提示STAT3并未參與介導N

5、SCLC的耐藥；③LRP在A549中表達增加，在A549/CARP呈高表達；MRP在A549中表達增加，在A549/CARP呈高表達；提示LRP、MRP均參與了誘導NSCLC的耐藥，但二者之間無相關性；④STAT3與LRP、MRP的表達無相關性，提示LRP、MRP介導的耐藥機制與STAT3信號傳導途徑無關；⑤活化的STAT3對腫瘤細胞的形成、生長、凋亡抑制等過程起著重要的調控作用，因此可通過破壞STAT3信號傳導來控制腫瘤細胞的生長和增